[发明专利]正品秦艽提取物及正品秦艽和各品种鉴别方法

说明书

技术领域

本发明涉及正品秦艽提取物及正品秦艽和各品种的鉴别方法。

背景技术

秦艽，是一种常用的中药材，为龙胆科植物秦艽Gentiana macrophylla Pall.、麻花秦艽Gentiana straminea Maxim.、粗茎秦艽Gentiana crassicaulis Duthie ex Burk.或小秦艽Gentiana dahurica Fisch.的干燥根。其味辛、苦，性平，归胃、肝、胆经，具有祛风湿、清湿热、止痹痛、退虚热的功效。

由于秦艽药材主要来自野生，生长周期长，价格稳步上涨，过度采挖已使法定正品秦艽药材供不应求，因此，市场上出现了较多伪品或劣品来替代正品秦艽。而秦艽更被列为国家三级保护植物。目前对正品秦艽的鉴别主要靠专家据其性状鉴别，或根据药典中的薄层色谱方法检测栎瘿酸进行鉴别。

中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材质量的真实性、优良性和稳定性。中药为多组分复杂体系，因此评价其质量应采用与之相适应的，能提供丰富鉴别信息的检测方法，建立中药指纹图谱将能较为全面地反映中药中所含化学成分的种类与数量，进而对药材质量进行整体描述和评价。

目前还未见使用HPLC指纹图谱技术对正品秦艽（粗茎秦艽、麻花秦艽、大叶秦艽和小秦艽）的品种鉴别的报道。

同时，目前在使用液相检测中药材质量时，多是采用对照品或指纹图谱进行检测，其中，采用对照品检测时，不能充分反映药材的质量；而采用指纹图谱时，虽然能够全面反应药材质量，但是，也可能因为检测仪器、流动相、环境条件等多种因素的差异，造成测量的误差。若能够提供一种药材的标准提取物，该提取物中包含了较多的有效成分，且物质基础明确，那么，将该提取物与指纹图谱检测手段联合使用后，必定能够避免或降低外界因素带来的误差，更能有效反映药材质量。

发明内容

本发明的目的在于提供一种正品秦艽的标准提取物。本发明的另一目的在于提供正品秦艽的鉴别方法以及正品秦艽中各药典品种的鉴别方法。

本发明提供了一种正品秦艽提取物，所述提取物采用HPLC检测所得色谱图与对照指纹图谱比较，相似度在0.9以上；其中，对照指纹图谱中有7个主色谱峰，各色谱峰信息如下：1号峰，相对保留时间0.48±0.01；2号峰，相对保留时间0.52±0.02；3号峰，相对保留时间0.78±0.01；4号峰，相对保留时间0.82±0.01；5号峰，即龙胆苦苷参照峰，相对保留时间1.00；6号峰，相对保留时间1.03±0.01；7号峰，相对保留时间1.52±0.01；

其中，色谱条件如下：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

检测波长：240±2nm；

流动相：以乙腈-0.05～1.0%v/v磷酸水溶液梯度洗脱，梯度程序如下：

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进一步地，对照指纹图谱中的7个主色谱峰的相对峰面积如下：1号峰，相对峰面积0.02±0.03；2号峰，相对峰面积0.36±0.36；3号峰，相对峰面积0.08±0.14；4号峰，相对峰面积0.08±0.11；5号峰即参照峰，相对峰面积1.00；6号峰，相对峰面积0.03±0.1；7号峰，相对峰面积0.01±0.02。

优选地，所述对照指纹图谱如图1所示。

本发明还提供了上述正品秦艽提取物的制备方法，具体操作如下：

取正品秦艽，粉碎后，以50%～80%v/v乙醇提取，合并醇提液；取醇提液，蒸发至无醇味后，剩余物以有机溶剂-水体系萃取，取水层，干燥后即得正品秦艽提取物；有机溶剂选自乙酸乙酯、异丙醇或氯仿。

本发明提供了正品秦艽的鉴别方法，它是采用HPLC指纹图谱进行检测的，具体操作步骤如下：

（1）取待测药材，粉碎后，以50%～80%v/v乙醇提取，合并醇提液；取醇提液，蒸发至无醇味后，剩余物以有机溶剂-水体系萃取，有机溶剂选自乙酸乙酯、异丙醇或氯仿，取水层，制备供试品溶液即可；

（2）取供试品溶液，经高效液相色谱法检测，即得供试品色谱图，其中，色谱条件如下：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；

检测波长：240±2nm；

流动相：以乙腈-0.05～1.0%v/v磷酸水溶液梯度洗脱，梯度程序如下：

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