[发明专利]一种纯化WALP肽的方法

权利要求书

1.一种纯化WALP肽的方法，所述方法包括以下步骤：

步骤1：采用反相色谱法对粗肽溶液进行纯化，其中以非极性键合硅胶或弱极性键合硅胶为固定相，甲醇为流动相A，乙腈为流动相B，进行梯度洗脱，收集目的峰值的肽溶液，所述流动相A和流动相B都含有三氟乙酸或甲酸；

步骤2：将所收集的肽溶液旋蒸冻干。

2.权利要求1的方法，其中所述粗肽溶液是用乙腈和甲醇的混合溶液溶解WALP粗肽所得到的溶液。

3.权利要求1的方法，其中所述粗肽溶液是用异丙醇、甲醇和乙腈的混合溶液溶解WALP粗肽所得到的溶液，其中所述异丙醇、甲醇和乙腈的体积比为1:0.1-5:0.5-20，优选1:0.5-2.5:1-10，更优选1:0.8-1:2-5。

4.权利要求1的方法，其中所述洗脱梯度为A体积%:5体积%-95体积%。

5.权利要求1的方法，其中所述流动相A和流动相B中三氟乙酸的浓度为0.001体积%-2体积%，更优选0.005体积%-0.5体积%，最优选0.01体积%-0.1体积%。

6.权利要求1的方法，其中所述流动相A和流动相B中甲酸的浓度为0.001体积%-2体积%，更优选0.005体积%-0.5体积%，最优选0.01体积%-0.1体积%。

7.权利要求1的方法，其中所述反相色谱法是反相高压液相色谱法。

8.权利要求7的方法，所述反相高压液相色谱法的制备柱直径为10mm-1000mm。

9.权利要求7的方法，其中所述反相高压液相色谱法的固定相为键合碳链C1、C4、C8、C18、氰基或苯基的硅胶；优选键合C4的硅胶。

10.权利要求9的方法，其中所述固定相为十八烷基硅烷键合硅胶、丁基烷基硅烷键合硅胶或氰基烷基硅烷键合硅胶。