[发明专利]一种黄牛ZBED6基因单核苷酸多态性的检测方法及试剂盒

权利要求书

1.一种黄牛ZBED6基因单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，以包含ZBED6基因的待测黄牛全基因组DNA为模板，以引物对P为引物，PCR扩增黄牛ZBED6基因，用限制性内切酶Hinf I消化PCR扩增产物之后，再对酶切后的扩增片段进行琼脂糖凝胶电泳；根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛ZBED6基因第一外显子第680位的单核苷酸多态性；

所述的引物对P为：

上游引物：CTGGAGGGCTATTTGTA；

下游引物：GGGCATCAGATACTGATTTATCACGTTTCTTACCGATT。

2.如权利要求1所述的黄牛ZBED6基因单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，所述的PCR扩增反应程序为：94℃预变性5min；94℃变性50s，55℃退火30s，72℃延伸7s，30～35个循环；72℃延伸10min。

3.如权利要求1所述的黄牛ZBED6基因单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，所述的琼脂糖凝胶电泳为质量浓度为4%的琼脂糖凝胶电泳。

4.如权利要求1所述的黄牛ZBED6基因单核苷酸多态性的检测方法，其特征在于，根据琼脂糖凝胶电泳结果鉴定黄牛ZBED6基因第一外显子第680位的单核苷酸多态性为：CC基因型表现为281bp条带；CG基因型表现为281bp、243bp和38bp条带；GG基因型表现为243bp和38bp条带。

5.黄牛ZBED6基因第一外显子第680位的单核苷酸多态性在鉴定不同黄牛群体多态性中的诊断应用。

6.黄牛ZBED6基因第一外显子第680位的单核苷酸多态性作为分子标记在黄牛辅助选育中的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，在辅助选育时，将基因型为CC和CG型的个体淘汰；基因型为GG型的个体留种进行扩繁。

8.一种检测黄牛ZBED6基因单核苷酸多态性的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的内容包括：

（1）特异引物，所述的特异引物包括:

上游引物：CTGGAGGGCTATTTGTA；

下游引物：GGGCATCAGATACTGATTTATCACGTTTCTTACCGATT；

（2）生化试剂，所述生化试剂包括：Taq DNA聚合酶，扩增模板，灭菌超纯水，限制性内切酶Sma I，包含Mg²⁺、dNTPs的2×Buffer，以及包含600bp、500bp、400bp、300bp、200bp和100bp的DNA Marker I。