[发明专利]利用复合酶提取动物小分子多肽及氨基酸的方法和工艺

说明书

技术领域

本发明属于蛋白质工程技术领域，特别是涉及一种利用复合酶提取动物小分子多肽及氨基酸的方法和工艺。

背景技术

与植物相比，动物体内的各种蛋白质的成分和比例与人更为接近，因而动物体内的蛋白质成分对人具有更高的营养价值，尤其是动物体内一些具有特定生理功能的小分子多肽及氨基酸(生物活性物质)，对人体新陈代谢具有重要的调节作用。传统的动物类产品主要采用物理方法(如破碎、高温等)进行加工，不但提取效率低，还会造成大量有效成分破坏，丧失生物活性。尽管现在个别加工过程采用了生物酶解技术，但严重忽视了一个问题(酶的选取应与动物组织结构相匹配)，使酶的降解效果不够理想。酶是由生物活体细胞产生的，受多种因素调节控制的具有催化能力的生物催化剂。与一般催化剂相比有其共同性，但又有显著的特点(如：酶的催化效率高，具有高度专一性等)。酶的种类很多，用于动物酶解的主要是蛋白酶。蛋白酶又分为内肽酶和外肽酶两类，要想充分利用动物体内的有效成分，就需要内肽酶和外肽酶结合，以充分降解蛋白质大分子为便于人体吸收利用的小分子多肽和氨基酸，这就需要发明一种复合酶解技术用于动物体内的蛋白质降解。

发明内容

本发明提供了一种利用复合酶提取动物小分子多肽及氨基酸的方法和工艺，操作简单，生产成本低，提高了动物蛋白质营养成分的利用率。

本发明所采用的技术方案是：

复合酶用于提取动物小分子多肽及氨基酸的方法和具体生产工艺为：

(1)将动物组织粉碎，使其能通过80目～200目筛子，加水配成浓度为8％～30％的混悬液；

(2)提高温度为35℃～40℃，用碳酸钠调节pH值为8.0～9.0，再加入动物组织0.5％～2.0％的复合酶I，然后将其放在超声装置中，14～16kHz超声酶解1h～2h，使细胞间的蛋白充分酶解，再用碳酸钠调节pH值为6.5～7.5，加入相当于动物组织0.5％～3.0％的复合酶II，充分搅匀，控制水浴的温度在37℃～45℃，15～17kHz超声酶解1h～6h，在酶解的同时需适当的搅动水浴，这样有利于酶的水解效果，缩短酶解时间；

(3)酶解完成后，提高酶解液温度至90℃～100℃，灭活酶20～30min；

(4)将酶解后的溶液经0.22μm微孔滤膜过滤；

(5)取滤液浓缩至相对密度为1∶1.0～1∶1.2，制得浓缩液。

复合酶包括复合酶I和复合酶II。

复合酶I主要由胰蛋白酶30％～70％、胰脂肪酶10％～40％和胰淀粉酶5％～30％组成，酶的活性单位为2万U/g～20万U/g，能够分解细胞间的脂肪和部分的蛋白质。

复合酶II是由Alcalase(碱性蛋白酶)5％～30％、Flavourzyme(复合风味蛋白酶)5％～30％、Protamex(复合蛋白酶)5％～30％、中性蛋白酶10％～50％、木瓜蛋白酶1％～30％组成，总质量组成为100％，酶的活性单位为5万U/g～30万U/g。

本发明的优点：利用酶反应所具有高度专一性的特点，选择内肽酶与外肽酶按比例混合，将动物体内的大分子蛋白分解为有利于人体吸收的小分子多肽及氨基酸，通过对细胞膜的破坏使细胞内的有效成分释放出来，既能提高酶解效率，又能降低生产成本。可应用于鲜海参、鲍鱼、牡蛎、猪骨、牛肉、鸡肝、鱼骨、猪蹄、鸡爪、猪皮、牛皮的加工。

具体实施方式

以下实施例用于更好地理解本发明，但不用来限制本发明所保护的范围。

实施例1：利用复合酶对海参进行酶解。

(1)取鲜海参1kg，粉碎使其能过80目筛子。

(2)加水制成10％的动物组织悬浮液，100℃加热30min，温度降至35℃～40℃时，用碱调pH值为8.0，加入肠激酶，搅拌均匀后加入相当于动物组织1.0％的复合酶I，37℃恒温孵育，15kHz超声酶解1h，调pH值为7.0，加入相当于动物组织1.5％的复合酶II，控制温度45℃，16.5kHz超声酶解2h。

(3)提高温度至100℃，快速灭活酶30min，然后自然冷却降温。

(4)将酶解后的溶液经0.22μm微孔滤膜过滤。

(5)取滤液浓缩至相对密度为1∶1.0，制得棕褐色的浓缩液。

实施例2：利用复合酶对鲜牡蛎肉进行酶解。

(1)取牡蛎肉1kg，粉碎使其能过100目筛子。