[发明专利]一种耐盐复合菌剂及其制备方法

权利要求书

1.一种耐盐复合菌剂，其特征在于：所述该菌剂由枯草芽孢杆菌和细黄链霉菌混合组成，所述枯草芽孢杆菌含有50～70份，所述细黄链霉菌含有30～50份，以上份数为质量份数。

2.一种耐盐复合菌剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

(1)首先分别将枯草芽孢杆菌、细黄链霉菌的菌种进行高密度培养，得到单菌体；

(2)然后将高密度培养得到的单菌体用载体吸附、制备成干燥的单一菌剂；以及

(3)最后将50～70份的枯草芽孢杆菌的单一菌剂与30～50份的细黄链霉菌的单一菌剂混合得到耐盐复合剂。

3.根据权利要求2所述的耐盐复合菌剂的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，所述载体包括草炭、蛭石及凹凸棒，所述草炭、蛭石及凹凸棒的质量比为1～5∶1～3∶0.2～0.5。

4.根据权利要求2所述的耐盐复合菌剂的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，所述单一菌剂中含有菌体为10～20％，以上百分比为质量百分比。

5.根据权利要求4所述的耐盐复合菌剂的制备方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌单一菌剂的制备方法包括以下步骤：

(1)将纯化培养的斜面培养基上的枯草芽孢杆菌菌种接种至装有体积比为15～30％的活化培养基的摇瓶中，在培养温度为36～40℃，摇瓶转速为150～200rpm的条件下，培养24～32小时；

(2)将活化培养好的枯草芽孢杆菌菌种接种到装有体积比为50～70％发酵培养基的发酵罐内，体积接种量为1～3％，在培养温度为36℃～40℃，发酵罐搅拌转速为200～220rpm的条件下，培养24～40小时，发酵罐中枯草芽孢杆菌的含量≥1×10⁹个/mL；以及

(3)将发酵得到的枯草芽孢杆菌单菌按质量百分比5～15％的比例经载体吸附得到单一菌剂。

6.根据权利要求5所述的耐盐复合菌剂的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述活化培养基包括15～20g/L的葡萄糖、10～15g/L的蛋白胨、3～7g/L的氯化钠和0.3～0.8g/L的牛肉膏。

7.根据权利要求5所述的耐盐复合菌剂的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，所述发酵培养基包括10～15g/L的玉米粉、3～8g/L的葡萄糖、18～22g/L的豆饼粉、3～8g/L的鱼粉、5～10g/L的碳酸钙、0.8～1.0g/L的硫酸铵、0.1～0.5g/L的磷酸氢二钾、0.1～0.3g/L的硫酸镁和0.1～0.3g/L的硫酸锰。

8.根据权利要求4所述的耐盐复合菌剂的制备方法，其特征在于，所述细黄链霉菌单一菌剂的制备方法包括以下步骤：

(1)将纯化培养的斜面培养基上的细黄链霉菌菌种接种至装有体积比为15～30％的活化培养基的摇瓶中，在pH为7.2-7.4，培养温度为26～30℃，摇瓶转速为150～200rpm的条件下，培养45～60小时；

(2)将活化培养的细黄链霉菌菌种接种到装有体积比为50～70％培养基的固体发酵罐内，接种量体积比为1～3％，在培养温度为27℃～30℃的条件下，培养90～120天，发酵罐链霉菌的含量≥1×10⁸个/mL；以及

(3)将发酵得到的细黄链霉菌单菌按质量百分比10～20％的比例经载体吸附得到单一菌剂。

9.根据权利要求8所述的耐盐复合菌剂的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述活化培养基包括20～25g/L的可溶性淀粉、1～1.5g/L的硝酸钾、0.5～1.0g/L的氯化钠、0.5～1.0g/L的磷酸氢二钾、0.5～1.0g/L的硫酸镁、0.01～0.05g/L的硫酸亚铁和1L的水。

10.根据权利要求8所述的耐盐复合菌剂的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，所述发酵培养基包括30～40％的肥土、10～20％的干牛粪、3～5％的豆饼粉、5～10％的草炭、5～10％的麦麸、10～20％的花生壳粉、5～10％的玉米粉、2～5％的石灰，所述发酵培养基的pH为6.7-8.5，以上百分比为质量百分比。