[发明专利]具有抗肿瘤活性的二萜类化合物libertellenone G和libertellenone H及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体是指从北极弯孢聚壳属真菌的次级代谢产物中提取的两种具有抗肿瘤活性的二萜类化合物libertellenone G和libertellenone H，及其它们在制备抗肿瘤药物中的应用。 

背景技术

由于极地特殊的气候环境，如低温、反复冻融和强辐射等，使得生存于此的微生物可能具有与温带，热带微生物不同的生理性状，并产生许多结构类型新颖，生物活性多样的次级代谢产物。随着从极地微生物代谢产物中发现大量结构独特、骨架新颖、活性显著的化合物，极地微生物次级代谢产物的研究已经逐渐成为国内外研究的热点。 

真菌弯孢聚壳菌属（Eutypella sp.）的次级代谢产物目前研究的比较少，仅有部分报道，从已知的报道中可知，该种属的次级代谢产物主要包括聚酮类如γ-内酯，苯并吡喃衍生物，二萜，三萜以及含氮的化合物（细胞松弛素、环肽）等。在已报道的结构中，各类化合物都具有多样的生物活性，如抑制HIV病毒、抗肿瘤、抗菌等。 

Libertellenone家族是一类从真菌中分离出来的二萜类的次级代谢产物，其结构母环属于海松烷型的三环二萜类，结构式如下所示，具有多羟基取代和高不饱和度的特点，是真菌次级代谢产物中一类重要的二萜类化合物。 

海松烷型二萜母核 

到目前为止得到了Libertellenone A-F六个该家族的化合物，结构式如下所示，经文献查阅，各化合物均显示出一定的抗肿瘤活性，见表1（参考文献：[1]Oh,D.Ch.;Jensen,P.R.;Kauffman,C.A.;Fenical W.Libertellenones A-D:Induction of cytotoxic diterpenoid biosynthesis by marine microbial competition.Bioorg.Med.Chem.2005,13,5267-73.；[2]Mariko,T.;Miyuki,F.;Kazuhiko,M.; Takeshi,S.;Toshihiro,S.;Kazuto,N.;Takashi,S.;Masahiro,I.;Kaoru,K.;Kunio,T.;Motoo,S.;Kiyotka,K.Chemical constituents of a marine fungus,Arthrinium sacchari.J.Nat.Prod.,2011,74,1645-9.；[3]Sun L.;Li D.L.;Tao M.H.;Chen Y.C.;Dan F.J.;Zhang W.M.Scopararanes C-G:new oxygenated pimarane diterpenes from the marine sediment-derived fungus Eutypella scoparia FS26.Mar.Drugs2012,10,539-50.）。 

表1：libertellenone A-G的对各肿瘤细胞株的活性（IC₅₀，μM） 

注：没有数据的是尚无文献报道该化合物对该类肿瘤细胞株的抑制作用。 

发明内容

本发明的目的在于从极地微生物中，具体是从北极弯孢聚壳属真菌的次级代谢产物中提取得到新的二萜类化合物，本发明的另一目的在于提供这些化合物制备抗肿瘤药物中的应用。 

本发明的技术方案如下：本发明所用的菌种是分离自北极地区Kongsfjorden的伦敦岛（海拔100米）土壤样品的弯孢聚壳属真菌D-1(Eutypella sp.D-1)，于2013年4月12日保藏于中国典型培养物保藏中心（简称CCTCC），保藏号为CCTCC M2013144。本发明从该弯孢聚壳属真菌D-1中分离获得两个具有抗肿瘤活性的新的天然产物，命名为libertellenone G和libertellenone H。 

本发明的第一方面，是提供了二萜类化合物libertellenone G和libertellenone H，具有如下结构式： 

libertellenone G，为黄色油状物，分子式C₂₀H₂₆O₃，分子量：314；高分辨质谱：315.1963(M+H)⁺，¹H和¹³C核磁共振谱数据见表2。