[发明专利]疫苗载体

说明书

本申请是申请号为200780021374.X，申请日为2007年6月11日，发明名称为“疫苗载体”的中国专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及新型低变应原性分子及其用途。

背景技术

I型过敏症是IgE介导的超敏性疾病，其影响大约25%的人口。它是基于特异性免疫球蛋白E对无害的空中传播的、昆虫、毒液、食物变应原和接触变应原抗原（源自本身无害的抗原来源，例如花粉、昆虫、霉菌和动物蛋白）的识别。与效应细胞结合的IgE抗体的交联引起炎性调节子（例如组胺，白细胞三烯（leucotrienes））的释放并因此引起过敏症的即刻症状（例如，鼻结膜炎、哮喘、皮炎、过敏反应）。通过IgE依赖性和IgE非依赖性机制进行的T细胞激活有助于慢性过敏性炎症。

过敏症治疗的可能的唯一致使形式为变应原特异性免疫治疗，其基于反复使用渐增数量的大多数来源的变应原提取物。很多临床研究证明了注射免疫治疗的临床功效，并有这种治疗下的几种免疫机理的证据。由于制备来自某些变应原来源的高质量变应原提取物的困难，以及向病人使用变应原会引起严重的副作用的事实，只能够向某些病人组和疾病表现来推荐变应原特异性免疫治疗。治疗对几种不同变应原来源共同敏感的病人以及遭受严重疾病表现例如过敏性哮喘的病人是特别困难的。过敏性哮喘是过敏症最严重的表现之一，因为它严重影响日常生活质量，引起高入院率，其表现为严重的、威胁生命的形式，需要对病人的深切关注。

从天然变应原来源制备的变应原提取物性质上是粗糙的，不可能通过技术手段影响这种制备物中的个别变应原的质量和数量。它们也含有各种不明确的非变应原性成分，几项最近的研究表明了这种提取物的劣质并证明了它们的高异质性。

在过去的十年中，使用重组DNA技术在分子变应原鉴定领域取得了巨大进步。很大数量的引起疾病的最重要的变应原已被鉴定至分子水平，已经生产出模拟天然变应原提取物表位复杂性的重组变应原。而且，几个研究小组已经使用已知的关于变应原结构的知识发展了确定的新的过敏症疫苗。已经使用遗传工程、合成肽化学和变应原与免疫刺激DNA序列的结合来减少新疫苗的变应原性活性，并因此减少治疗诱导的副作用率。以这种变应原衍生物进行了第一个有前景的临床研究。有趣的是，虽然可以强烈减少或甚至消除遗传工程化重组变应原和源自变应原的合成的包含T细胞表位的肽的IgE反应活性，但是这些衍生物仍然可以诱导全身性副作用（出现于注射几小时后）。例如，有报道指出，在皮内注射几个小时以后，主要猫变应原Fel d1的T细胞表位肽诱导了哮喘和支气管的高反应性，且有力证据表明，这种效应是T细胞介导的和MHC限制性的。

这些结果表明，除去IgE反应活性可减少IgE介导的副作用，因为在这些免疫治疗研究的过程中未记录到即现反应。但是，变应原特异性T细胞表位（被保留在重组变应原衍生物以及肽混合物中）是造成延迟的副作用（例如非常有问题的或过敏性皮炎，慢性T细胞介导的过敏性皮肤表现）的原因。在重组变应原衍生物的情况下，所引起的副作用相对轻微，在T细胞肽疫苗的情况下可通过足够的剂量来克服。因此这两种新方法似乎对过敏性鼻结膜炎的免疫治疗都是有前景的，但对于治疗严重形式的过敏性哮喘（其中肺中的延迟副作用的诱导可能是非常有问题的）可能具有局限性。

为了使用并因此激发针对肽、多肽和蛋白的有效免疫反应，通常使用佐剂和/或载体。例如，完全氟氏佐剂，是一种可获得的最有力的佐剂。但是，由于其副作用，不允许用于人类。因此，需要能够诱导针对肽和多肽（源自变应原，当然，和其他抗原）的强烈免疫反应的疫苗组合物，以避免使用完全氟氏佐剂。而且，虽然在一个动物模型中已成功使用BSA作为载体，它可能不适宜用于人类疫苗组合物，因为具有有害反应的风险，例如传播朊病毒病（变异型克雅氏病，（variant Creutzfeldt-Jakob disease））的风险。发展有效的针对变应原疫苗的一个进一步挑战是需要能够迅速降低个体或动物中变应原的免疫反应。因此，需要血液中高浓度的变应原特异性抗体（主要是IgG亚型）。在粘膜表面IgA抗体是主要的亚型。

霍乱毒素（一个现有技术中已知的载体蛋白），通常也用作佐剂，减少疫苗组合物中完全氟氏佐剂的需要。但是，霍乱毒素增加总的和特异性的IgE抗体水平，并引起IgE相关的炎性反应。