[发明专利]蛹虫草蛋白质提取物及其抗肿瘤的应用

说明书

技术领域

本发明涉及蛹虫草蛋白质提取物及其抗肿瘤的应用。

背景技术

蛹虫草(Cordyceps militaris)，隶属于子囊菌门、核菌纲、麦角菌目、麦角菌科、虫草属的子囊真菌，是一种珍贵的药用真菌。蛹虫草化学成分和药理作用与冬虫夏草相似，在临床上常替代冬虫夏草入药。蛹虫草具有杀菌、消炎、增强免疫力等功效，不仅能食用，而且还可制成保健品和药品。人工栽培蛹虫草时，往往遇到出草率下降的情况，王贺祥等着重讲述了野生蛹虫草菌株的分离和高产菌株的筛选的方法，以提高人工栽培的商业效率。林金盛等总结了蛹虫草药用机理，并提出了解决蛹虫草产业化栽培瓶颈的几项对策。现代科学论证，蛹虫草中含有多种有效成分，不仅具有特殊的营养价值，而且有明显的药用价值，其中尤以虫草素、虫草多糖等多种生物活性物质的药用价值最为显著。祁波等建立了从蛹虫草中综合提取虫草素和虫草多糖的最佳工艺。采用正交试验对蛹虫草中虫草素和虫草多糖综合提取工艺进行了研究，为进一步开发利用提供有价值的参考数据。姜明兰等用苯酚-硫酸法分别测定了野生和人工栽培的蛹虫草中多糖的含量。结果显示，两种蛹虫草的多糖含量都很高，野生蛹虫草的多糖含量比人工栽培的蛹虫草高许多。江晓路等分别用薄层层析法和高碘酸氧化法测定了蛹虫草、冬虫夏草及其发酵菌丝中腺昔和甘露醇的含量。虫草多糖被医学界认为是非常好的免疫促进剂之一，可增强机体免疫力。目前的研究进展还未发现从蛹虫草子实体中提取蛋白类物质直接杀伤肿瘤细胞的报道。

发明内容

本发明所要解决的一个技术问题是提供具有抗肿瘤活性的蛹虫草蛋白质提取物。

本发明所提供的蛹虫草蛋白质提取物，按照包括如下步骤的方法制备：

1）将蛹虫草子实体粉碎后用水浸提，收集水溶性物质得到蛹虫草水溶性提取物；

2）对所述蛹虫草水溶性提取物进行饱和度为80%的硫酸铵沉淀，收集沉淀，对所述沉淀用去离子水透析后，得到所述蛹虫草蛋白质提取物。

上述步骤1）中，所述用水浸提可为在2-6℃用水浸提10-14小时。所述水可为去离子水。

所述蛹虫草子实体可为新鲜的子实体也可为干燥的子实体。所述干燥的子实体是将新鲜的蛹虫草子实体在常温（如20-25℃）下干燥得到的。

所述新鲜蛹虫草子实体和水的体积比可为1：4-6，如1：4。

上述步骤1）中，可采用离心收集所述水溶性物质。离心收集所述水溶性物质的离心力可为6000-15000g（如12000g），离心时间可为10-20分钟（如15分钟）。上述步骤2）中，也可采用离心收集所述沉淀。离心收集所述沉淀的离心力可为6000-15000g（如12000g），离心时间可为10-20分钟（如15分钟）。

上述步骤2）中，在4℃对所述蛹虫草水溶性提取物进行饱和度为80%的硫酸铵沉淀。

上述步骤2）中，所述用去离子水透析采用截留分子量为3kDa半透膜进行。

上述制备方法还包括将透析后的半透膜内的液体在3000-9000g（如6000g），离心10-20分钟（如15分钟），收集上清液，将该上清液进行冷冻干燥，制备成蛹虫草蛋白质提取物干粉的步骤。

本发明所要解决的另一个技术问题是提供上述蛹虫草蛋白质提取物的用途。

本发明所提供的上述蛹虫草蛋白质提取物的用途，为下述A或B：

A、抗肿瘤或肿瘤细胞的产品（如药物、保健品和/或食品），其活性成分为上述蛹虫草蛋白质提取物；

B、上述蛹虫草蛋白质提取物在制备抗肿瘤或肿瘤细胞的产品（如药物、保健品和/或食品）中的应用。

上述用途中，所述肿瘤可为实体肿瘤。

所述实体肿瘤可为肝癌、乳腺癌和/或肺癌；所述肿瘤细胞可为肝癌细胞、乳腺癌细胞和/或肺癌细胞。所述肺癌可为肺腺癌，所述肺癌细胞可为肺腺癌细胞。

所述肝癌细胞可为人肝癌细胞，如HepG2细胞；所述乳腺癌细胞可为人乳腺癌细胞，如MCF-7细胞；所述肺癌细胞可为人肺腺癌细胞，如A-549细胞。

上文中，所述蛹虫草具体可为蛹虫草（Cordyceps militaris）（安徽）CFCC89535。