[发明专利]血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂及其应用

说明书

技术领域：

本发明涉及药物领域，具体涉及用于预防和治疗类风湿性关节炎的血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂。

背景技术：

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是临床最常见的炎性关节病和主要致残因素之一。在全世界约为0.5%-1.0%，RA的发病在我国约为0.4%。RA可发生于任何年龄，随着年龄的增长，发病率也随之增高。女性高发年龄为45-55岁，性别与RA发病关系密切，男女之比约1:3。

新生血管生成，在正常生理条件下，受到高度调节，在生殖、胚胎发育、组织修复和创伤愈合中是必不可少的过程。血管生成在多种病理条件下也发生，例如RA。RA的病理过程中，血管新生是一种标志性的组织学改变，新生血管形成伴随滑膜增生和炎细胞浸润，是RA中血管翳形成及关节破坏的基础。原来应该没有血管存在的关节软骨因某种异常变化，而形成新的血管，使得软骨受到侵蚀，造成关节变形或疼痛。新生血管引起类风湿关节炎患者滑膜组织发生异常变化，正常人的关节滑膜内层仅 1-2层细胞组成，而RA患者的滑膜内层通常有4-10层细胞(有时甚至超过20层)。这些细胞不仅在数量上异常增多，而且在功能上处于异常活跃的状态，它们可以分泌大量的细胞因子、信号分子和蛋白酶，加速关节破坏的进程。 

血管内皮生长因子受体2（VEGFR2）亦称含激酶插入域的受体(KDR), 属于受体酪氨酸激酶超家族。VEGFR2在新生血管生成过程中起着主要的作用。 其配体VEGF通过刺激细胞表面VEGFR2活化内皮细胞，发生生化信号的复杂级联与细胞外基质组分和可溶性因子相互作用，导致腔管形成并且分化成成熟的血管。另外，这些被活化的细胞经过细胞增殖过程，来提高细胞粘附分子的表达，增加蛋白水解酶的分泌，增加细胞迁移和侵袭。 

目前, 靶向KDR的抑制剂已成为开发新兴抗血管新生药物的研究热点。尽管如此，并没有成熟开发的血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂问世，用于治疗RA。 

发明内容：

本发明目的是针对设计一种血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂，可以用于治疗RA。

本发明技术方案是提供一种血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂2,其序列为Asn-Ala-Asn-Gly-Arg-Thr，及在制备治疗类风湿性关节炎药物中的应用。 

本发明的原理在于血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂与VEGFR2结合，抑制VEGFR2产生生理或病理的效应，起到抑制血管内皮细胞增殖，迁移，血管腔管形成，以及相关细胞因子分泌，从而起到治疗类风湿关节炎的作用。 

有益结果：

本发明中的血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂2序列Asn-Ala-Asn-Gly-Arg-Thr，可以靶向抑制血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶, 抑制VEGFR2产生的生理或病理的效应，达到预防或治疗类风湿性关节炎的效果。

发明人经过大量实验获知血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂2能够抑制佐剂型大鼠类风湿关节炎和DBA/1小鼠胶原型类风湿性关节炎的发展，体内实验证明具有显著的治疗类风湿型关节炎的效果，并且副作用少。说明本发明设计的血管内皮生长因子受体2酪氨酸激酶多肽抑制剂2科学、合理、可行有效，能作为治疗类风湿性关节炎药物。 

附图说明:

附图1多肽抑制剂分子构像示意图。1.Asn天冬酰氨，2.Ala丙氨酸， 3.Asn天冬酰氨，4.Gly 甘氨酸，5.Arg 精氨酸，6.Thr苏氨酸。

具体实施方式

实施例1 

多肽的化学合成方法

多肽用Fmoc化学方法合成。合成反应从C端向N端进行，Rink介质（可在Advanced ChemTech公司购得）上有自由氨基，顺序连接Thr，Arg，Gly，Asn，Ala和Asn。每一步连接过程中，氨基酸残基都要活化，活化混合物中有4倍于介质上自由氨基的HBTU，HOBt，DIEA和Fmoc-氨基酸。每次氨基酸的连接反应之后，都用一个吡啶/醋酸/N-甲基咪唑（4:1:0.5）的混合物来封闭未连接的自由氨基，封闭反应10 min。每次氨基酸的连接反应之后，下一个氨基酸连接之前，都要把介质上的Fmoc-基团去掉，去Fmoc-基团使用含20%哌啶的二甲基甲酰胺，需15分钟。最后，当所有氨基酸残基顺序连接之后，多肽用98%三氟乙酸从介质上切割下来，切割在室温下进行2小时。