[发明专利]一种法医学上物种鉴定方法

说明书

技术领域

本发明属于法医鉴定学技术领域，具体涉及一种法医学上物种鉴定方法。

背景技术

种属鉴定是法医物证检验的一个重要步骤，对现场提取的各种生物检材进行种属鉴定是进行其他鉴定的首要及关键环节。其主要任务是鉴定法科学生物检材的种属来源，确定检材是否来自人体。我们采用PCR复合扩增-琼脂糖电泳检测的方法，进行种属鉴定。

传统的种属检验方法包括，核DNA序列的特异性检验(PCR-RFLP)，mtDNA的测序分析，和免疫学的检验方法等等。目前法医检验广泛采用的是免疫试纸条分析，其原理是免疫扩散实验，即用血痕或精斑的浸出液与预加在试纸条上的抗体反应。

目前的种属检验方法有一下缺陷：

1、Alu序列种属鉴定法：Alu序列为人和灵长类所特有，区分不开人与猴；Alu序列是核基因组DNA，需要得到核基因组模板才能进行有效地鉴定，这样需要更多的DNA，故降低了其灵敏度；而mtDNA在动物细胞中含量要比细胞核DNA多出成千上万的拷贝，如果有合适的方法，必将使得检测灵敏度大大提高。

2、mtDNA进行种属检验经常采用测序的办法费用昂贵，该方法是将某些mtDNA的编码基因扩增测序，将其序列在基因库中进行同源性比对后才能做出种属的判断。虽然该方法可能鉴别出检材究竟来自何种动物，然而检测过程烦琐，测序费用昂贵；并且法医学实践中较为常见的只需判别该生物性检材是否来自人类。

3、公安常用的种属检验试纸条：首先、目前公安检验中的种属试纸条为针对血痕和精斑的试纸条，只能检测血或者精斑的种属特异性，对于其他组织如骨、毛发唾液则无能为力；其次、试纸条检验的特异性不高，猴的会误测为人的；最后、非常重要的是，在刑事案件现场的生物检材会受到诸多因素，如雨淋、酶解、污染等的影响，而蛋白质分子容易变性降解和受环境的影响，免疫试纸条容易得到假阴性结果。

4、现在公安上采用DNA STR位点进行荧光STR复合扩增用于个体识别和亲权鉴定。其技术发展之速度远快于种属检验技术的发展，以至于现在做个体识别所需的检材量(荧光复合扩增自动分型技术)少于种属实验所需的检材量(公安常用的试纸条)。这样，如果检材按照常规方法先进行种属检验，则剩余的检材不足以进行STR分型，甚至检材根本不足以进行种属检验，造成检材和证据的浪费。而直接进行STR分型有可能造成假排除，原因在于：当遇到法医痕量检材(pg级别的检材，如小于大米粒大小的血痕检材等)，由于检材量太低，为了得到STR分型，可能会放弃种属检验(种属检验所需检材量远大于DNA-STR分型所需量)而直接进行DNA-STR分型检验，如果得到完整的分型结果即可确定或排除嫌疑人，但是当只是得到部分的STR分型结果时(由于检材降解、痕量或污染、扩增体系等原因造成)，由于并非全部STR位点都具有种属特异性，这样得到的部分STR分型有可能是动物组织造成的，也可能是人的组织但是没有得到STR全部分型，如果据此来认定或排除嫌疑人，往往会得出错误结论，尤其容易造成假阴性(假排除)。

发明内容

为了解决目前法医学上进行物种鉴定存在的上述问题，本发明的目的在于公开了一种法医学上物种鉴定方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种法医学上物种鉴定方法，包括下述步骤：

(1)、以生物检材的mtDNA为模板，以12SF1/12SR、12SF2/12SR、COX1F/COX1R和16SF/16SR引物对混合物为引物进行PCR扩增，其中12SF1的序列如SEQ ID No.1所示，12SR的序列如SEQ ID No.2所示，12SF2的序列如SEQ ID No.3所示，COX1F的序列如SEQ ID No.4所示，COX1R的序列如SEQ ID No.5所示，16SF的序列如SEQ ID No.6所示，16SR的序列如SEQ ID No.7所示；

(2)、对步骤(1)的PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，当电泳条带为三条时，待检生物检材为人体组织；当电泳条带为两条时，待检生物检材为动物组织。