[发明专利]通过电泳特异性分离富集小分子量蛋白质或多肽的方法

权利要求书

1.通过电泳富集样品中小分子量蛋白质或多肽的方法，其特征在于：所述电泳中采用的电泳支持载体是不同孔径的介质，所述的介质可以是聚丙烯酰胺凝胶；所述聚丙烯酰胺凝胶由浓缩胶、分离胶和位于所述浓缩胶和所述分离胶之间的储存胶和隔离胶组成；所述隔离胶的层数可大于或等于1层；所述浓缩胶在电泳过程中不作为分子筛参与蛋白质的分离，样品经过所述浓缩胶被浓缩；所述分离胶根据分子筛作用对样品进行分离，根据被分离物质的相对分子质量的要求选择分离胶的浓度；所述储存胶用于接纳来自所述浓缩胶的样品，防止样品在浓缩胶和所述隔离胶界面扩散；所述隔离胶用于截阻分子量大于30kDa的蛋白质；

所述小分子量蛋白质或多肽的分子量小于等于30kDa。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述浓缩胶中，凝胶浓度为4%-5%，凝胶的交联度为2%-3%；

所述储存胶中，凝胶浓度为6%-15%，凝胶的交联度为2%-3%；

所述隔离胶中，凝胶浓度为20%，凝胶的交联度为2%-3%；

所述分离胶中，凝胶浓度为10%-20%，凝胶的交联度为2%-3%。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述储存胶为一层，所述储存胶的凝胶浓度为10%；所述隔离胶为一层，所述隔离胶的凝胶浓度为20%；所述分离胶的凝胶浓度为10%-16%。

4.根据权利要求1或2或3所述的方法，其特征在于：所述浓缩胶的凝胶浓度为5%。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述浓缩胶的交联度为2.6%；所述分离胶的凝胶浓度为12%。

6.根据权利要求1至5中任一所述的方法，其特征在于：所述电泳中采用的电泳缓冲液为N-三(羟甲基)甲基甘氨酸（tricine）凝胶系统缓冲液或普通Glycine-SDS-PAGE电泳缓冲液；所述的tricine凝胶系统缓冲液由正极缓冲液和负极缓冲液组成；所述正极缓冲液的工作液由三羟甲基氨基甲烷(Tris)、盐酸和水组成，水为溶剂，所述正极缓冲液的工作液中，Tris的浓度为0.1M，盐酸浓度为0.0225M；所述正极缓冲液的工作液pH值为8.9；

所述负极缓冲液的工作液由Tris、tricine、十二烷基硫酸钠和水组成，水为溶剂，所述负极缓冲液的工作液中，Tris的浓度为0.1M，tricine的浓度为0.1M，十二烷基硫酸钠的浓度为0.1%（质量百分含量）；所述负极缓冲液的工作液pH值为8.25；

所述普通Glycine-SDS-PAGE电泳缓冲液的工作液由三羟甲基氨基甲烷、甘氨酸、十二烷基硫酸钠和水组成，水为溶剂，所述普通Glycine-SDS-PAGE电泳缓冲液的工作液中Tris的浓度为3g/L，甘氨酸的浓度为14.4g/L，十二烷基硫酸钠的浓度为1g/L。

7.根据权利要求1至6中任一所述的方法，其特征在于：进行电泳时，电泳起始电压为30V，当溴酚蓝进入所述浓缩胶后，调整电压到200V直至电泳结束。

8.通过电泳分离小分子量蛋白质或多肽的聚丙烯酰胺凝胶，其特征在于：所述聚丙烯酰胺凝胶为权利要求1至5中任一所述方法中的聚丙烯酰胺凝胶；

所述小分子量蛋白质或多肽的分子量小于等于30kDa。