[发明专利]京海黄鸡16周龄体重的分子遗传标记及应用

说明书

技术领域

本发明涉及家禽育种领域，具体涉及一种利用三基因联合效应提高鸡上市体重的方法。

背景技术

虽然常规育种方法在家禽遗传改良中取得一定进展，但它对数量性状的选择要在个体生长发育到一定时期，育种周期长，费用高。鸡的生长性状大部分是由多基因控制的数量性状，表现值是由内在的多基因和外在的环境共同作用的结果，如果从多个基因入手进行分子辅助育种，不仅可以加快育种进程，还可以全面提高鸡的生长性能。许多研究结果表明，有多个基因位点影响鸡的生长性状。因此，在研究这类性状时，需要同时对多个位点进行分析，这样才能得到基因与性状之间的真实相关性，在利用DNA标记进行辅助选择时才可能会获得更大的遗传进展。

胰岛素样生长因子（IGFs）是一类多肽因子，因其化学结构与胰岛素原类似而得名。胰岛素样生长因子系统是胚胎和动物出生后生长的主要决定因素。然而，IGFs的作用又受到很多因素的调节，其中胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBPs）对其具有重要影响。胰岛素样生长因子结合蛋白-1（IGFBP-1）主要的生物学作用是运输和调节IGF-I与受体结合。胰岛素样生长因子结合蛋白-2（IGFBP-2）具有广泛的生物学功能，它能调节IGFs、TGFβ等生长因子的生物活性。胰岛素信号转导在细胞和生物体的代谢、生长、发育中起非常重要的作用。已发现许多生物大分子参与这一信号途径，信号转导和转录激活5b（STAT5b）就是其中之一。本专利的独特之处是发现IGFBP-1、IGFBP-2和STAT5b三基因联合对生长性状的效应。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种利用三基因联合效应提高鸡上市体重（16周龄体重）的方法，该方法利用IGFBP-1、IGFBP-2和STAT5b基因的复合基因型对鸡的上市体重进行标记辅助选择，不受环境影响。

本发明公开了IGFBP-1、IGFBP-2和STAT5b基因作为京海黄鸡16周龄体重的分子遗传标记的应用。

基于上述应用的一种利用三基因联合效应提高鸡上市体重的方法，是：提取待测样本的鸡基因组DNA，经序列如SEQ ID NO：1-6所示的特异性引物扩增得到192、250和270bp的目的片段，目的片段经SSCP分析，凝胶电泳后用银染显色，得到DNA的SSCP图谱，根据3个图谱中的带型筛选IGFBP-1、IGFBP-2和STAT5b基因的基因型分别为BB/KL/OP基因型的个体，也就是在2276、2359、3746、3753和3754、9221和9401bp处分别为T、C、G/T、T/C、T/C、A和T/C等位基因个体。

本发明的原理是：针对IGFBP-1、IGFBP-2和STAT5b基因分别设计1对引物，IGFBP-1引物的扩增产物经SSCP分析产生3种基因型（AA、AB和BB），直接测序表明BB型与AA型相比在2276bp处发生了A→T突变，在2359bp处发生了T→C突变；IGFBP-2引物的扩增产物经SSCP分析产生3种基因型（KK、KL和LL），LL型与KK型在3746bp处发生了G→T突变，在3753bp处发生了TT→CC的突变；STAT5b引物的扩增产物经SSCP分析产生5种基因型（OO、OP、OQ、PP和PQ），QQ型与OO型相比检测到A9921G突变，PP型和OO型相比发现一处T9401C突变。3个基因不同复合基因型与京海黄鸡16周龄体重的相关分析表明，三基因复合基因型BB/KL/OP在所有复合基因型中的16周龄体重最高，显著的高于AB/KK/OP基因型（P<0.05）。该选择的效果显著，检测方法简单快捷，且不受外界环境的影响，可以用于京海黄鸡16周龄体重的分子遗传标记。

附图说明

图1是IGFBP-1基因的SSCP图谱。1，2：BB型；5，6：AA型；3，4：AB型。

图2是IGFBP-1基因的测序图。

图3是IGFBP-2基因的SSCP图谱。1，2，6：KK；3，5：LL；4：KL。

图4是IGFBP-2基因的测序图。

图5是STAT5b基因的SSCP图谱。1：QQ型；2：PP型；3：PQ型；4，5：OQ型；6，8：OP型；7：OO型。

图6是STAT5b基因的测序图。

具体实施方式

实施例1

1.试验材料