[发明专利]一种芡实多糖提取物的制备方法及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及药物制备技术，具体涉及一种芡实多糖提取物的制备方法及其应用。

背景技术

芡实主要产于东北、河北、河南、山东、江苏、安徽、四川、云南、贵州、江西、广西、湖南、湖北以及沿海地带。芡实有南芡实和北芡实。南芡实产于湖南、苏南、皖南等南方地区。北芡实产于山东、苏北、皖北等北方地区。

芡实是一种珍贵的药食兼用的水生经济作物种子，具有很高的营养价值和多种保健功能。

芡实具有补脾止泻、固肾涩精之功，为健脾止泻、益肾固精之良药，被誉为“水中人参”，治遗精，淋浊，带下，小便不禁，大便泄泻。中医认为，芡实调整脾胃功能。脾健则水湿自去，肾气旺则固摄有权，久久服之，诸症自消。芡实含有丰富的蛋白质、维生素，矿物质及其他微量元素。芡实可以加强小肠吸收功能，提高尿木糖排泄率，增加血清胡萝卜素浓度。实验证明，血清胡萝卜素水平的提高，可使肺癌、胃癌的发病机率下降，大大减少癌症发生的机会。

我国台湾学者用乙醇提取195种中草药，研究表明，其中22种强于等重量的生育酚的抗氧化能力，其中金锦香、石榴皮、马鞭草的甲醇提取物和金锦香、芡实、钩藤的乙酸乙脂提取物的抗氧化能力均强于BHA(丁基茎羟基茴香醚)。

随着人们生活节奏的加快，越来越多的人处于一种运动性疲劳的亚健康状态下。运动性疲劳影响着人们的日常生活和工作，使人们的工作效率下降，更重要的这种疲劳使人觉得浑身酸疼。

发明内容

本发明的目的在于研究芡实多糖提取物是否具有抗疲劳作用，以期将其应用于抗疲劳药物的制备中。

本发明的技术方案如下：

芡实多糖的提取与纯化：

（1）Sevag法提取芡实多糖：蒸馏水溶解芡实粗多糖，等体积加入Sevag试液，摇匀，静置3-4h，弃去下层氯仿溶液及中间的蛋白层，反复操作10-12次，水层水浴加热挥尽有机溶剂，旋转蒸发仪浓缩，用95vol%乙醇调节含醇量为80vol%，静置过夜，离心收集沉淀，冷冻干燥；

（2）三氯乙酸法纯化芡实多糖：蒸馏水溶解芡实粗多糖，等体积加入5%三氯乙酸水溶液，再加入相同量的正丁醇，摇匀，静置20-30min，弃去上层的正丁醇层及中间的蛋白层，反复操作4-5次，以NaOH溶液中和水层至中性，水浴加热挥尽正丁醇，用旋转蒸发仪浓缩至一定体积，用95vol%乙醇调节含醇量为80vol%，静置过夜，离心收集沉淀，冷冻干燥。

药理实验：以13只22-25g重的小鼠为试验对象。在给小鼠灌药之前记录下小鼠进行速度15m/min的跑步训练，连续运动一个小时中，小鼠疲劳状态的次数。5只高剂量组小鼠每天灌胃给予120mg/mL芡实多糖水混悬物1mL每天，5只低剂量组小鼠每天灌胃给予60mg/mL芡实多糖水混悬物1mL每天，3只对照组小鼠灌胃给予蒸馏水1mL每天，三组小鼠各灌胃7天。一周灌药结束后，使小鼠进行速度为20m/min的跑步训练，连续运动一个小时中，小鼠疲劳状态的次数。统计整理数据，研究芡实多糖对小鼠抗疲劳度的能力是否有作用。

本发明通过实验证明芡实多糖对于抗疲劳具有较好的作用。

具体实施方式

实施例1：

本实施例所用仪器及动物：

ZH-PT型计算机控制动物实验跑台（淮北正华生物仪器设备有限公司）；昆明小鼠，雄性，体重（19g±3.05）。饲养于室温24-26℃、湿度50%-70%、自然光照、自由饮用水的动物饲养房中。

芡实多糖提取：

（1）Sevag法提取芡实多糖：蒸馏水溶解芡实粗多糖，等体积加入Sevag试液(氯仿:正丁醇=4:1)，摇匀，静置约3h，弃去下层氯仿溶液及中间的蛋白层，反复操作10次，水层水浴加热挥尽有机溶剂，旋转蒸发仪浓缩，95vol%乙醇调节含醇量为80vol%，静置过夜，离心收集沉淀，冷冻干燥；

（2）三氯乙酸法纯化芡实多糖：蒸馏水溶解芡实粗多糖，等体积加入5%三氯乙酸水溶液，再加入相同量的正丁醇，摇匀，静置约20min，弃去上层的正丁醇层及中间的蛋白层，反复操作4次，以NaOH溶液中和水层至中性，水浴加热挥尽正丁醇，用旋转蒸发仪浓缩至一定体积，用95vol%乙醇调节含醇量为80vol%，静置过夜，离心收集沉淀，冷冻干燥。

硫酸-蒽酮法显色：蒽酮0.2g，加入100ml浓硫酸搅拌使其溶解，倒入棕色瓶中，混合摇匀置于冰箱中。