[发明专利]一种microRNA分子及其在癌症药物制备中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，更具体而言本发明涉及分子医药领域，特别是微小RNA分子的医药用途。

背景技术

miRNA(microRNA，又称微小RNA)是一类内生的长度约18-25个核苷酸(nt)的小单链发夹结构RNA(Eacker et al.，2009)。miRNA通过与蛋白质编码基因的mRNA转录本互补结合而发挥作用。已经发现microRNA参与多个生物学过程，例如细胞的发生、分化、凋亡、增殖、衰老、代谢等众多过程(Zhang et al.，2010)。最近的研究表明，microRNA基因的表达与许多癌症具有相关性，从基因组上分析，大约有50％已注释的microRNA定位于肿瘤相关的脆性位点(Fragile site)。已有专利申请公开了miR-34作为肿瘤治疗干预的靶标(US2009/0227533，Bader et al.，)。越来越多的研究表明，microRNA在疾病的发生、发展中扮演着重要的角色。

自噬(Autophagy)是继凋亡(Apoptosis)后、也是当前生命科学领域研究的一大热点。自噬不仅可以维持细胞的生长、发育以及稳态平衡(Yang et al.，2010)，而且其在疾病的发生、发展中发挥着重要的作用。在过去十多年对自噬的研究中，科学家们发现自噬与神经退行性疾病、肿瘤、微生物感染、肌病和心脏病，甚至与寿命延长均有密切的联系(Klionsky et al.，2007)。

自噬可以决定细胞的存活。在正常生理条件下，自噬水平较低，然而在病理生理过程中，自噬水平明显上调(Yan et al.，2010；Zhang et al.，2011)。在多种生物过程中，microRNA已被证实能后转录调控蛋白编码基因的表达(Huang et al.，2010)，而且最近越来越多的研究结果表明microRNA可以调控多种疾病的自噬通路，最值得关注的是癌症。最近已有研究表明，microRNA通过调节一些自噬关键基因Atgs而影响自噬过程的不同阶段(Xiao et al.，2011；MP et al.，2011)。伴随研究的不断进展，人们发现microRNA对肿瘤细胞自噬的调控有两种形式：致癌性和抑癌性。致癌性表现的实例为：NB4急性髓细胞性白血病细胞中miR-106(属于高致癌miRNA家族)高表达，同时直接下调ULK mRNA的水平(Shioya et al.，2010)；miR-221/222抑制细胞周期抑制剂p27Kip1(是下游PI3KCI/Akt的调控者)导致人类乳腺癌MCF7细胞自噬性细胞死亡(Roccaro et al.，2010)；在Hun-7和MCF7细胞中，miR-376b直接下调Beclin1和Atg4C的翻译水平，以削弱雷帕霉素诱导的自噬，从而起到致癌的作用(Abraham et al.，2011)；敲除miR-183基因可诱导甲状腺髓样癌细胞发生自噬性细胞死亡，此时LC3B1水平上调，这表明了miR-183可作为一种潜在的治疗靶点(Frankel et al.，2011)。抑癌性表现的实例为：在雷帕霉素诱导的T98G细胞自噬中，miR-30a可负调控beclin1的表达来降低自噬的活性(Chowdhury et al.，2002)；miR-101通过靶向Atg4D，STMN和RAB5A抑制MCF7的自噬水平(MP et al.，2011)。

卵巢癌是女性生殖器官常见的肿瘤之一，发病率位居第三位，对女性生命造成严重的威胁。卵巢癌的病因目前尚不完全清楚，microRNA在卵巢癌细胞自噬中的作用目前尚未有报道。

本领域亟待需要发现microRNA的治疗用途，特别是用于卵巢癌细胞自噬的用途。

发明内容

本发明是基于发现一种microRNA本身不影响肿瘤细胞的生长，但可促进肿瘤细胞的药物敏感性，所述药物为具有肿瘤治疗作用的制剂，如化疗剂或靶向治疗药物，优选所述化疗剂为铂类化合物、萜类化合物，所述铂类化合物优选为顺铂或卡铂。所述萜类化合物最优选紫杉醇药物。所述microRNA为miR-556，选自成熟体miR-556-3p、或前体序列miR-556、或miR-556-5p。所述miR-556-3p的核苷酸序列为序列表中的SEQ ID NO：1，miR-556的核苷酸序列为序列表中的SEQ ID NO：2，miR-556-5p的核苷酸序列为序列表中的SEQ ID NO：3。也就是说，本申请是基于发现miR-556-3p或其前体与同源物和肿瘤药物的协同作用。