[发明专利]一种优化的人乳头瘤病毒31型L1蛋白的基因序列

权利要求书

1.编码人乳头瘤病毒31型L1蛋白的分离的核酸，其特征在于，所述分离的核酸以TAG为终止密码子；优选地，所述核酸的核苷酸序列针对在大肠杆菌中的表达进行了优化；更优选地，所述核酸的核酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.包含权利要求1的分离的核酸的载体。

3.包含权利要求2的载体的宿主细胞，优选为原核宿主细胞，更优选为大肠杆菌细胞。

4.一种HPV31病毒样颗粒，其含有权利要求1的分离的核酸编码的蛋白，或者由权利要求1的分离的核酸编码的蛋白组成。

5.一种组合物，其包含权利要求1的分离的核酸，或权利要求1的分离的核酸编码的蛋白，或权利要求2的载体，或权利要求3的宿主细胞，或权利要求4的HPV31病毒样颗粒。

6.一种药物组合物或疫苗，其包含权利要求4的HPV31病毒样颗粒，任选地还包含药学可接受的载体和/或赋形剂，

优选地，所述HPV31病毒样颗粒以预防HPV感染或宫颈癌有效量存在；

优选地，所述药物组合物或疫苗还包含至少一种选自下列的病毒样颗粒：HPV6L1蛋白病毒样颗粒，HPV11L1蛋白病毒样颗粒，HPV16L1蛋白病毒样颗粒，HPV18L1蛋白病毒样颗粒，HPV45L1蛋白病毒样颗粒，HPV33L1蛋白病毒样颗粒，HPV52L1蛋白病毒样颗粒和HPV58L1蛋白病毒样颗粒。

7.制备HPV31L1蛋白的方法，其包括利用原核表达系统表达编码HPV31L1蛋白的分离的核酸，所述分离的核酸以TAG为终止密码子；然后将含有该蛋白的裂解上清进行纯化处理，

优选地，所述方法包括步骤：

a)在大肠杆菌中表达编码HPV31L1蛋白的分离的核酸，

b)将表达HPV31L1蛋白的大肠杆菌在盐浓度为100mM-600mM的溶液中破碎，分离得到上清液，加入还原剂，优选地，所述还原剂为DTT或2－巯基乙醇，其用量为10mM-100mM，

c)将获得的HPV31L1蛋白通过色谱层析进行纯化；

优选地，所述原核表达为大肠杆菌表达系统。

8.制备权利要求4的HPV31病毒样颗粒的方法，其包括步骤：

将根据权利要求7的方法制备的HPV31L1蛋白去除还原剂。

9.一种制备疫苗的方法，其包括将权利要求4的HPV31病毒样颗粒或通过权利要求8的方法获得的HPV31病毒样颗粒与药学可接受的载体和/或赋形剂混合，任选地还混合一种或多种选自HPV6，11，16，18，45，33，52和58的HPV型别的病毒样颗粒。

10.权利要求1的分离的核酸编码的HPV31L1蛋白，或权利要求4的HPV31病毒样颗粒，或通过权利要求7的方法制备的HPV31L1蛋白，或通过权利要求8的方法制备的HPV31病毒样颗粒在制备药物组合物或疫苗中的用途，所述药物组合物或疫苗用于预防HPV感染或由HPV感染所导致的疾病，

优选地，所述HPV感染是HPV31感染；

优选地，所述由HPV感染所导致的疾病是宫颈癌。