[发明专利]肿腿蜂携带黄曲霉防治杨十斑吉丁虫幼虫的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种杨十斑吉丁虫（Melanophila picta Pallas）幼虫防治方法，具体涉及白蜡吉丁肿腿蜂Sclerodermus pupariae携带黄曲霉Aspergillus flavus防治杨十斑吉丁虫幼虫的方法。

背景技术

杨十斑吉丁初龄幼虫在树皮与木质部间为害，取食树木的韧皮部组织，随着虫龄的增长逐渐深入，直达形成层，虫粪不外排，造成杨、柳等为害树木死亡，其为隐蔽性生活的特点用常规防治手段很难达到良好的防治效果，危害严重时每株虫口密度可达50-60头,甚至高达百头,被害株率可达到60-90％，严重者造成整片树林死亡,使政府林农投资和苦心经营十几年的林木毁于一旦，影响森林面积的进一步扩大，对新疆防护林体系和生态安全构成威胁。

目前，杨十斑吉丁生物防治方法具有以虫治虫、以菌治虫，不污染环境、维护生态内部平衡、可持续稳定防治的特点。肿腿蜂能够自行寻找、发现并寄生杨十斑吉丁这类隐蔽性危害的害虫。利用天敌微生物防治是生物防治有效手段之一，但在实际的应用中，天敌微生物防治效果受环境因子的影响较大，由于杨十斑吉丁幼虫在树干内危害，喷洒天敌微生物很难直接接触到幼虫虫体，造成防治效果不稳定。

本发明由白蜡吉丁肿腿蜂携带黄曲霉，利用白蜡吉丁肿腿蜂对寄主杨十斑吉丁的靶向性，对杨十斑吉丁幼虫进行虫生真菌的感染，提高杨十斑吉丁幼虫死亡率，提高生物防治效果。

发明内容

本发明目的在于，提供一种肿腿蜂携带黄曲霉防治杨十斑吉丁虫幼虫的方法，该方法利用白蜡吉丁肿腿蜂携带黄曲霉主动传染杨十斑吉丁幼虫，在肿腿蜂寄生的同时，增加杨十斑吉丁幼虫感染虫生真菌的机率，由于白蜡吉丁肿腿蜂和虫生病原真菌的协同复合效应，对杨十斑吉丁幼虫的防治有增效作用，提高了杨十斑吉丁幼虫死亡率，对寄主有较强的选择性和专化性，对高等动植物无毒害作用，不污染环境，具有可持续控制作用。该方法合理，可操作性强。解决了杨十斑吉丁防治难度大、防治效果差、农药残留等问题。为杨十斑吉丁幼虫的防治提供了新的途径。

本发明所述的一种肿腿蜂携带黄曲霉防治杨十斑吉丁幼虫的方法，具体操作按下列步骤进行：

a、虫生真菌培养：将黄曲霉接种于PDA平板上，温度23-28℃，培养5-7天，将纯培养的菌株接种于15mm×150mm 的PDA试管斜面中，温度23-28℃培养至产生大量分生孢子；

b、肿腿蜂带菌：选取健康活泼的白蜡吉丁肿腿蜂，放入步骤a已产孢子的黄曲霉试管斜面中，塞好棉塞任其爬行12-24小时；

c带菌肿腿蜂释放：在杨十斑吉丁虫幼虫尚未化蛹之前，选择晴好天气，风力不大，气温在20-30℃，释放携带黄曲霉的白蜡吉丁肿腿蜂，放蜂时，拔掉试管棉塞，将试管斜放在树木根部或将管口套在树木小枝上，带菌白蜡吉丁肿腿蜂即可自行爬出试管，寻找杨十斑吉丁幼虫。

步骤b放入已产孢子的黄曲霉试管中每管白蜡吉丁肿腿蜂数量为20-35头。

白蜡吉丁肿腿蜂Sclerodermus pupariae从中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所生物防治研究室引进。

白蜡吉丁肿腿蜂，属膜翅目Hymenoptera，肿腿蜂科Bethylidae。形态特征：成虫性二型显著，雄性具翅，长约为2.5 mm。雌性部分有翅，长约3.0-4.0 mm，体较雄性大。翅与腹末齐平，触角比体短13节。头黑褐色方形。腹部背面可见7节。前足腿节膨大，各足胫节上有一端距。幼虫蛆型，乳白色，老熟后体长2.5 mm左右，宽0.60 mm左右。茧丝质、长椭圆型，初期为白色，后期为黄褐色。卵长椭圆型，乳白色半透明，一端略大。卵粒长约0.5 mm、宽约0.2 mm。

黄曲霉 Aspergillus flavus，曲霉属。菌落生长较快，结构疏松，表面灰绿色，背面无色或略呈褐色。菌体有许多复杂的分枝菌丝构成。营养菌丝具有分隔；气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗，顶端产生烧瓶形或近球形顶囊，表面产生许多小梗（一般为双层），小梗上着生成串的表面粗糙的球形分生孢子。

黄曲霉 Aspergillus flavus分离于自然感病死亡的杨十斑吉丁虫幼虫；