[发明专利]一种生物组织培养法繁育苏玛栎优株的方法

权利要求书

1.一种生物组织培养法繁育苏玛栎优株的方法，其特征在于，包括以下步骤：a、环剥苏玛栎获得基部萌条；b、在基部萌条中选取带腋芽的萌条作为外植体，经表面消毒；c、初代培养、d、增殖培养；e、壮苗培养；f、生根培养获得生根试管苗；g、生根试管苗进行移栽。

2.根据权利要求1所述的一种生物组织培养法繁育苏玛栎优株的方法，其特征在于包括下列进行：

a、在气温回升的春季，于优树树干基部进行环割，深至韧皮部，待萌芽条萌动并生长至5~20 cm时，选择晴朗天气的午后采集获得基部萌条；

b、在基部萌条中选择生长健壮，无病虫害的苏玛栎带腋芽的萌条做为起始外植体，用洗洁精擦洗表面后，流水冲洗20分钟，再进行消毒处理；

c、将消毒处理后的外植体接种到初代培养基上，进行初代培养；

d、将初代培养的无菌苗转入增殖培养基，诱导不定芽；

e、将诱导出的丛生芽分切后，转移至壮苗培养基，进行壮苗培养；

f、将经壮苗培养生长到1.5cm以上的试管苗分切后，转移至生根培养基中；

g、对所得的生根试管苗进行清洗，移至珍珠岩、草炭土的混合基质中进行栽种。

3.根据权利要求1所述的一种生物组织培养法繁育苏玛栎优株的方法，其特征在于：步骤a中，在气温回升的春季，于优树树干离地面约10~30 cm处进行环割，环割树干周长的1/3~4/5，环割口宽0.1cm ~1cm，深至韧皮部，待萌芽条萌动并生长至5~20 cm时，选择晴朗天气的午后采集获得基部萌条，保湿保鲜。

4.根据权利要求1所述的一种生物组织培养法繁育苏玛栎优株的方法，其特征在于：步骤b中，取苏玛栎包含腋芽的萌条，切取成为长度0.5~2.5cm，腋芽位于中间的茎段，切去叶片，保留两片叶柄基部保护腋芽生长点，进行消毒处理；先用72%浓度的酒精消毒30~60s，再用无菌水冲洗3~4次，然后用加有0.1~0.2%的升汞液浸泡15~30分钟，用无菌水冲洗至无残留，得到无菌的外植体。

5.根据权利要求1所述的一种生物组织培养法繁育苏玛栎优株的方法，其特征在于：步骤c中，初代培养基为WPM+6-苄基氨基嘌呤（6-BA）0.15~0.25mg·L^-1+奈乙酸（NAA）0.15~0.25mg·L^-1+生物素1~10mg·L^-1+乙酰胆碱1~10mg·L^-1+核黄素1~10mg·L^-1+蔗糖25~35g·L^-1+琼脂4~12g·L^-1。

6.根据权利要求1所述的一种生物组织培养法繁育苏玛栎优株的方法，其特征在于：步骤d中，增殖培养基为WPM+6-苄基氨基嘌呤（6-BA）0.1~2.5mg·L^-1+奈乙酸（NAA） 0.1~0.5 mg·L^-1+生物素1~10mg·L^-1 +乙酰胆碱1~10mg·L^-1+核黄素1~10mg·L^-1+蔗糖20~40 g·L^-1+琼脂4~12 g·L^-1。

7.根据权利要求1所述的一种生物组织培养法繁育苏玛栎优株的方法，其特征在于：步骤e中，所述的壮苗培养基为WPM+6-苄基氨基嘌呤（6-BA）0.15~0.25mg·L^-1+奈乙酸（NAA）0.15~0.25mg·L^-1+生物素1~10mg·L^-1+乙酰胆碱1~10mg·L^-1+核黄素1~10mg·L^-1+蔗糖25~35g·L^-1+琼脂4~12g·L^-1。