[发明专利]一种用两阶段溶氧控制技术提高发酵生产柠檬酸产量的方法

权利要求书

1.一株用于高效生产柠檬酸的黑曲霉（Aspergillus niger H915-1），所述黑曲霉于2013年5月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2013172，保藏地址为中国武汉武汉大学。

2.一种用两阶段溶氧控制技术提高如权利要求1所述黑曲霉发酵生产柠檬酸产量的方法，其特征在于，在发酵第一阶段控制溶氧为45-55%，在发酵第二阶段控制溶氧为35-45%；所述发酵第一阶段时间为28-32h；所述发酵第二阶段时间为37-50h。

3.根据权利要求2的方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将黑曲霉A.niger H915-1先转茄子瓶斜面培养基在37℃培养箱中培养72h，然后将孢子用无菌水洗下接种到含有35L发酵培养基的50L种子罐，溶氧控制为DO40%，温度37℃，发酵培养24h，使黑曲霉孢子萌发生长，最终发酵液pH下降到2以下；

（2）将种子发酵液转接到含有350L发酵培养基的500L发酵罐，接种量10%，在发酵的第一阶段控制溶氧水平50%，在发酵的的第二阶段控制溶氧水平40%；所述发酵第一阶段时间为28-32h；所述发酵第二阶段时间为37-50h。

4.根据权利要求3的方法，其特征在于，所述茄子瓶斜面培养基为黑曲霉专用的木薯原料天然培养基。

5.根据权利要求3的方法，其特征在于，所述发酵培养基培养基为玉米浆，玉米清液，总糖为15%(g/g)，总氮为0.08%(g/g)。

6.根据权利要求5的方法，其特征在于，所述玉米清液是通过板框压滤机过滤玉米混液得到的，玉米混液是含糖量很高的经淀粉酶处理过的玉米粉液。