[发明专利]一种丝素微球的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种丝素微球的制备方法，丝素微球可以做为药物缓释的载体。

背景技术

蚕丝丝素由18种氨基酸组成，由丝素制备的材料生物相容性优良，在体内可以缓慢降解，因此丝素微球在药物缓释载体方面的应用受到广泛的关注。在微球形态的丝素材料制备方面，目前已经有乳化（Yaowalak Srisuwanl）、凝固沉淀（Joydip Kundu）、喷雾干燥（Joo-Hong Yeo）、喷雾冷冻-冷冻干燥-交联（Esther wenk）等方法。如公开日为2008年08月20日，公开号为CN101244277的中国专利中，公开了一种丝素载药微球的制备方法，它采用水/油/水型的复乳技术和蛋白质的自组装技术，将水溶性药物与再生丝素溶液充分混合后，加入到搅拌中含有一定量乳化剂的油相中乳化，再加入有机溶剂搅拌，使丝素变性和结构Β化而形成乳白色结晶性丝素微粒的同时，药物被包埋，经离心除去上层液再加入有机溶剂，让丝素蛋白进一步结晶，药物继续被包埋，再离心除去溶剂和残留油相并收集微球；该丝素载药微球的制备方法属于乳化方法。

不同的制备方法的微球在包埋不同药物时的效果不同，释放机理和时间也不同，微球制备方法的设计需要针对药物的特性，目前还没有包埋效率高，药物随丝素微球降解而缓慢均匀的释放，生物相容性优良，适合于包埋和缓释纳米颗粒药物、多肽药物和酶类药物的丝素微球的制备方法。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的上述不足，而提供一种包埋效率高，药物随丝素微球降解而缓慢均匀的释放，生物相容性优良的丝素微球的制备方法。

本发明解决上述问题所采用的技术方案是：该丝素微球的制备方法的特点在于：所述制备方法的步骤如下：在3-10 wt%的再生丝素溶液中加入所需包埋和缓释的药物，然后滴加入2-10 wt%的凝固剂，在80-120转/分钟的转速下缓慢搅拌，得到混合溶液；将混合溶液喷雾入-20℃～-80℃的空间凝结，收集冰微粒，将冰微粒继续在-20℃～-80℃的空间保存2小时以上；然后将冰微粒在0℃～室温下解冻，在0℃～室温下洗除凝固剂，离心或滤网收集得到丝素微球。本发明中的丝素微球具有包埋效率高，生物相容性优良的优点，药物随丝素微球降解而缓慢均匀的释放，药物缓释丝素微球可以直接使用外，还可以复合入生物材料中使用。

作为优选，本发明所述所需包埋和缓释的药物为纳米颗粒药物、多肽药物或酶类药物。

作为优选，本发明所述再生丝素溶液为家蚕、柞蚕和其他野蚕丝中的一种或者两种以上混合后的再生丝素溶液。

作为优选，本发明所述凝固剂为二甲亚砜、水溶性环氧化合物、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇和叔丁醇中的一种。

作为优选，本发明在0℃～室温下洗除凝固剂时，采用蒸馏水多次换水浸泡的方式洗除凝固剂。

作为优选，本发明所述丝素微球的粒径与喷雾细度有关，丝素微球的粒径呈离散分布，平均粒径在10～1000微米。

作为优选，本发明所述丝素微球在0℃～4℃保存待用，或经过低温真空干燥后保存待用，或经过冷冻干燥后保存待用。

作为优选，本发明当所用的凝固剂为水溶性环氧化合物时，将混合溶液喷雾入-20℃～-80℃的空间凝结，收集冰微粒后，冰微粒继续在-20℃～-80℃的空间保存2小时以上；当所用的凝固剂为二甲亚砜时，将混合溶液喷雾入-20℃～-80℃的空间凝结，收集冰微粒后，冰微粒继续在-20℃～-80℃的空间保存12小时以上；当所用的凝固剂为丙醇、异丙醇、正丁醇或叔丁醇时，将混合溶液喷雾入-20℃～-80℃的空间凝结，收集冰微粒后，冰微粒继续在-20℃～-80℃的空间保存24小时以上；当所用的凝固剂为甲醇或乙醇时，将混合溶液喷雾入-20℃～-80℃的空间凝结，收集冰微粒后，冰微粒继续在-20℃～-80℃的空间保存48小时以上。

本发明与现有技术相比，具有以下优点和效果：包埋效率高，药物随丝素微球降解而缓慢释放，生物相容性优良；药物缓释丝素微球可以直接使用外，还可以复合入其他材料和饲料等中使用；本发明在喷雾—冷冻过程中已经形成了不溶于水的丝素微粒，无需再经冷冻干燥-交联；丝素微球内外固化结构均匀，降解缓慢均匀；因在低温下固化丝素微球，固化剂不与丝素和药物反应，这些水溶性的固化剂可以浸泡除去，而纳米颗粒药物、多肽、酶类药物与丝素蛋白有弱结合，被固定住在丝素微球内将随丝素微球降解而释放。本发明尤其适用于包埋和缓释纳米颗粒药物、多肽和酶类药物。