[发明专利]bHLH17蛋白及其编码基因和其应用

说明书

技术领域

本发明属于基因工程领域，具体涉及一种与植物生长发育和抗病性相关蛋白及其编码基因和其应用。

背景技术

拟南芥(Arabidopsis thaliana)是现代国际和国内进行植株生物学研究的模式植物。拟南芥属被子植物门，双子叶植物纲，十字花科。对拟南芥基因功能的深入研究将有助于作物性状的遗传改良。

植物在进化过程中会形成对害虫或病原菌危害所产生的一定程度的避害、耐害或抗生的生态适应性。植物抗性，即植物抗逆性，是指植物对不良环境条件(如低温、高温、干旱、盐渍、病虫害等)的适应性和抵抗力。植物抗性基因的发现、克隆及其应用对于利用植物基因工程改造农作物和改善生态环境具有重大意义。

发明内容

本发明提供了一种植物bHLH17蛋白及其编码基因和其应用，所述bHLH17蛋白来源于拟南芥(Arabidopsis thaliana)。

本发明的一个目的是提供一种蛋白，是如下1)或2)的蛋白：

1)序列表中的SEQ ID №.2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

2)将序列表中的SEQ ID №.2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物生长发育和抗病性相关的由1)衍生的蛋白质。

所述2)中，所述植物生长发育具体指植物抽薹开花。

所述2)中，所述植物抗病性具体指植物抗假单胞菌或灰霉菌的抗性。

所述2)中，所述目的植物为双子叶植物或单子叶植物；所述双子叶植物具体为拟南芥。

序列表中SEQ ID №.2所示的氨基酸序列由566个氨基酸残基组成。

上述1)和2)中的bHLH17蛋白可人工合成，也可先合成其编码基因，再进行生物表达得到。上述1)和2)中的bHLH17蛋白的编码基因可通过将序列表中SEQ ID №.1所示的DNA序列缺失一个或几个氨基酸残基的密码子，和/或进行一个或几个碱基对的错义突变后得到。

编码所述bHLH17蛋白的核酸分子也属于本发明的保护范围。

所述核酸分子可以是DNA，如cDNA、基因组DNA或重组DNA；所述核酸分子也可以是RNA，如mRNA、hnRNA或tRNA等。

当所述核酸分子是DNA时，其序列是下述核苷酸序列之一：

1)序列表中SEQ ID №：1第1-1698位的核苷酸序列；

2)编码序列表中SEQ ID №：2蛋白质序列的多核苷酸序列；

3)在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID №：1限定的DNA序列杂交的核苷酸序列；

4)与1)或2)或3)限定的DNA序列具有90％以上同源性，且编码相同功能蛋白质的DNA序列；具体的，所述同源性为95％以上；再具体的为96％以上；再具体的为97％以上；再具体的为98％以上；再具体的为99％以上。

上述高严谨条件可为用6×SSC，0.5％SDS的溶液，在65℃下杂交，然后用2×SSC，0.1％SDS和1×SSC，0.1％SDS各洗膜一次。

其中，序列表中的SEQ ID №：1由1701个核苷酸组成，其开放阅读框架(ORF)为自5′末端第1-1698位核苷酸，编码序列表中SEQ ID№：2所示的蛋白质，即本发明所述的bHLH17蛋白。

含有上述核酸分子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌也属于本发明的保护范围。

所述重组载体可为重组表达载体，也可为重组克隆载体。

所述重组表达载体可用现有的表达载体构建。所述表达载体还可包含外源基因的3’端非翻译区域，即包含聚腺苷酸信号和任何其它参与mRNA加工或基因表达的DNA片段。所述聚腺苷酸信号可引导聚腺苷酸加入到mRNA前体的3’端。使用所述基因构建重组表达载体时，在其转录起始核苷酸前可加上任何一种增强型、组成型、组织特异型或诱导型启动子，它们可单独使用或与其它的启动子结合使用；此外，使用本发明的基因构建重组表达载体时，还可使用增强子，包括翻译增强子或转录增强子。为了便于对转基因植物细胞或植物进行鉴定及筛选，可对所用植物表达载体进行加工，如加入在植物中表达可产生颜色变化的酶或发光化合物的基因(GUS基因、GFP基因、萤光素酶基因等)、具有抗性的抗生素标记物(庆大霉素标记物、卡那霉素标记物等)或是抗化学试剂标记基因(如抗除莠剂基因)等。从转基因植物的安全性考虑，可不加任何选择性标记基因，直接以逆境筛选转化植株。