[发明专利]一种响应面法优化山茱萸果核中鞣质的提取工艺

说明书

技术领域

本发明属于化学技术领域，涉及一种响应面法优化山茱萸果核中鞣质的提取工艺。

背景技术

山茱萸(Cornus officinalis Sieb.et Zuc)为山茱萸科落叶乔木，其味酸、涩，性温，归肝，肾经，其主要成分有皂苷，鞣质，有机酸，黄酮，多糖，蛋白质，氨基酸，挥发性成分等。我国山茱萸每年的总产量约5000余吨，其中，占总重量80％的果核被废弃，目前山茱萸果肉入药不能满足市场需求，因此，充分开发和利用山茱萸果核是解决市场需求的主要措施。研究表明，山茱萸果核主要的成分是粗纤维，鞣质，蛋白质，油脂和其他一些矿物质及有机酸等。其中鞣质占有15％-16％，在国内外研究中，鞣质具有抗肿瘤，抗氧化，抗病毒，抗过敏、疤疹以及收敛止血、止泻，抗菌，保护粘膜，降血糖等作用，有时也用作生物碱及重金属中毒的解毒剂。其药用有效成分已经逐渐为人们所认识。但是现有技术中急需一种响应面法优化山茱萸果核中鞣质的提取工艺

发明内容

本发明的目的在于克服上述技术缺陷，提供一种响应面法优化山茱萸果核中鞣质的提取工艺，对山茱萸果核中鞣质含量进行了响应面法优化，并确定了最佳提取工艺，为山茱萸果核的开发利用提供了理论基础和实验依据。其技术方案为：

一种响应面法优化山茱萸果核中鞣质的提取工艺，包括以下步骤：取1g山茱萸果核粉末置锥形瓶中，加入22ml42％乙醇，在温度51℃条件下，超声71min。

进一步优选，乙醇浓度42％，料液比1：22。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

本发明响应面法优化山茱萸果核中鞣质的提取工艺得到的鞣质含量为69.2622mg/g。该工艺节省了资源，缩短了提取时间，提高了鞣质的得率，为下一步研究山茱萸果核中鞣质的药理作用和化学结构提供了可靠的实验依据，并为今后开发新的药用资源奠定基础。

附图说明

图1为单因素对提取方法的影响，其中，图1(a)不同的提取方法对鞣质含量的影响，图1(b)不同的提取溶剂对鞣质含量的影响，图1(c)不同的浸泡时间对鞣质含量的影响，图1(d)不同的乙醇浓度对鞣质含量的影响，图1(e)不同料液比对鞣质含量的影响，图1(f)不同超声时间对鞣质含量的影响，图1(g)不同超声温度对鞣质含量的影响；

图2为溶剂浓度和料液比对鞣质含量的影响；

图3为溶剂浓度和超声时间对鞣质含量的影响；

图4为溶剂浓度和超声温度对鞣质含量的影响；

图5料液比和超声时间对鞣质含量的影响；

图6为料液比和超声温度对鞣质含量的影响；

图7为超声时间和超声温度对鞣质含量的影响。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施方式对本发明的技术方案作进一步详细地说明。

材料与方法

材料与试剂

丹风山茱萸干燥果核，粉碎，过40目筛，备用。没食子酸(购自Sigma公司，≥99.9％)，

钨酸钠、钼酸钠、磷酸、硫酸锂、无水碳酸钠、乙醇、甲醇、丙酮溶液等均为分析纯。

仪器设备

手提式粉碎机(温岭市林大机械有限公司，型号：DFT-50)，分析天平(河北虹宇仪器设备有限公司，型号：FA2004N)，SHB-HIA型循环水式多用真空泵(陕西太康生物科技有限公司)

超声仪(宁波新芝生物科技股份有限公司，型号：SB25-12DTD)，超微量分光光度计(美国BioTek，型号：Epoch)。

方法

标准曲线的制备

按2010版药典附录XB绘制。

对照品的制备：精密称取1mg没食子酸标准品，用超纯水定容到20ml棕色容量瓶，制备0.05mg/ml对照品溶液，待用。

标准曲线绘制：精密取对照品溶液4、8、12、16、20、24、28、32、36、40ul置于96孔板中，加入磷钼戊酸试液8ul，再分别补加蒸馏水到96ul，最后加入96ul29％Na₂CO₃溶液，静置30min后，以相应的试剂作为空白对照，在760nm处测吸收值，以吸收值为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，得到方程：Y＝54.91X+0.008，其中，R²＝0.9990，在浓度0.001-0.01mg/ml范围内浓度和吸收值呈良好的的线性关系。

鞣质含量测定