[发明专利]银耳菌株离子束注入诱变选育方法及所育的一个银耳菌株有效
申请号: | 201310228604.7 | 申请日: | 2013-06-08 |
公开(公告)号: | CN103270945A | 公开(公告)日: | 2013-09-04 |
发明(设计)人: | 刘桂君;尚宏忠;顾海科;吴美钦;李庭伟;周思静;孟佑婷;杨素玲;温贤芳 | 申请(专利权)人: | 北京市辐射中心;古田县州洋农业科技有限公司 |
主分类号: | A01H1/06 | 分类号: | A01H1/06;A01G1/04;A01H15/00 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王朋飞 |
地址: | 100875 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 银耳 菌株 离子束 注入 诱变 选育 方法 一个 | ||
技术领域
本发明属于食用菌培育领域,特别涉及银耳菌株离子束注入诱变选育方法及所育的一个银耳菌株。
背景技术
银耳又称白木耳,属于菌物界,担子菌门,银耳纲,银耳目,银耳科,银耳属,是一种珍贵的药食兼用的胶质菌,营养价值十分丰富。我国是银耳的主要生产国,出口量约占世界银耳贸易量的90%以上。目前银耳现有栽培品种主要有黄色银耳和白色银耳两种,主要来自于野生银耳菌种的长期驯化及人工选择,这种传统的银耳菌种选育方法培育出的银耳菌种产量不高,且容易退化,不稳定。目前迫切需要发掘高产、稳定、品质优良的银耳菌种资源,提高银耳产量的同时提升银耳品质。
离子束注入诱变技术是20世纪80年代由中国科学院余增亮等人首先应用于农作物育种中,用于选育水稻、小麦、玉米等农作物,随着技术的发展,逐渐应用于微生物诱变育种研究,并且成功选育花生四烯酸生产菌株等,是一种有效的育种手段。离子束注入诱变技术与传统的紫外线、X射线、γ射线等相比,除了具有能量沉积外,还有动量传递,质量沉积及电荷交换等效应。加之可根据不同的诱变育种需要,选用不同种类的离子、能量、剂量进行组合,因而具有突变谱广、突变率高、突变体遗传稳定性高、回复突变率低等优点。现有文献报道,全卫丰等人发明的专利CN102067788B公开了一种低能N+离子束注入诱变选育灵芝菌株的方法,并成功的选育出了一株高产的灵芝菌株。
尚未见到有关采用离子束注入技术诱变选育银耳的任何报道。一般来说不同种类的微生物,细菌类菌体细胞的大小和细胞壁的薄厚不同、真菌类孢子大小和孢子壁薄厚不同,因此对离子束注入能量、剂量的耐受程度不同,存活率和突变率也不一致,会使得不同种类的微生物具有不同的最佳诱变条件,在此条件下能够得到较高的突变率,能够筛选得到较多的突变菌株,尤其是我们想要得到的正突变菌株,这种方法是不能从一种微生物照搬到另外一种微生物的。
因此本发明针对银耳菌株进行离子束注入技术诱变是一项创造性工作,选育得到的菌株为目前市场上不能获得的菌株。
发明内容
为开拓银耳菌种选育的新途径,发掘高产、稳定、品质优良的银耳菌种,本发明的目的在于提供银耳菌株离子束注入诱变选育方法及所育的一个银耳菌株。
本发明提供一种银耳菌株离子束注入诱变选育方法,包括如下步骤:
1)用无菌水洗下银耳出发菌株新鲜耳片上的担孢子,涂布到金属培养皿上,无菌风吹干;
2)真空条件下,对金属培养皿上的银耳担孢子进行低能N+离子束注入诱变,能量为30kev,真空度为10-3Pa,采用连续注入方式,辐射诱变剂量为1×1015-2.5×1015ions/cm2;
3)培养诱变后的银耳担孢子,筛选菌体干重比银耳出发菌株高的银耳菌株;
4)将步骤3)筛选到的银耳菌株和香灰菌菌株配对后栽培,测定栽培后的产量,筛选产量提高的菌株,并分离保存菌株。
步骤1)所述出发菌株为产量高、品质好的现有银耳菌株。
步骤1)所述银耳出发菌株新鲜耳片,为出发菌株瓶栽获得的新鲜干净的银耳耳片。
步骤1)所述涂布,用玻璃棒或金属棒涂布。
本发明还提供所述银耳菌株离子束注入诱变选育方法在银耳菌株选育中的应用。
以本发明银耳菌株离子束注入诱变选育方法选育的一个银耳菌株(Tremella fuciformis),其保藏号为CGMCC No.7458,于2013年4月24日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编100101。
所述保藏号为CGMCC No.7458的银耳菌株遗传性状稳定,产量比原菌株提高13.5%,银耳多糖含量提高5.41%。
本发明还提供所述银耳菌株作为栽培菌株的应用。
本发明的有益效果:
本发明的银耳菌株离子束注入诱变选育方法,摸索到了针对银耳菌株的离子束注入诱变的最佳剂量,以本发明的方法诱变银耳菌株,能筛选到更多高产的银耳突变菌株,大大拓宽了银耳菌株选育的范围。
本发明所述的保藏号为CGMCC No.7458的银耳菌株遗传性状稳定,产量比原菌株提高13.5%,银耳多糖含量提高5.41%,是优良的银耳菌株。
附图说明
图1为本发明实施例1离子束注入剂量对银耳孢子存活率的影响曲线图。
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