[发明专利]一个植物启动子及其应用

说明书

技术领域

本发明属于基因工程领域，具体涉及一种植物启动子和其应用。

背景技术

拟南芥(Arabidopsis thaliana)作为一种模式生物，被广泛应用于植物学研究中，包括植物遗传学、分子生物学、生物信息学和发育生物学等。拟南芥是植物中首个被进行全基因组测序的物种，并且有繁殖周期短、在温室条件下易培养、基因组小、结籽多等优点。

在长期的生物进化过程中，植物为了抵御各种生物和非生物胁迫，形成了一套复杂而精细的调控机制，其中就包括通过转录因子进行的基因表达的转录调节。bHLH(basic helix-loop-helix)转录因子广泛存在于真核生物中，在拟南芥中有一百六十多个bHLH成员，在植物的生长发育、胁迫应答和次生代谢过程中发挥重要的生理功能。

发明内容

本发明提供了一种植物bHLH03pro启动子和其应用，所述bHLH03pro启动子来源于拟南芥(Arabidopsis thaliana)。

本发明的一个目的是提供一种启动子，所述启动子具有下述核苷酸序列之一：

1)序列表中SEQ ID №：1所示的核苷酸序列；

2)在高严谨条件下可与序列表中SEQ ID №：1限定的DNA序列杂交的核苷酸序列；

3)与1)或2)或3)限定的DNA序列具有90％以上同源性，且具有相同功能的DNA序列；具体的，所述同源性为95％以上；再具体的为96％以上；再具体的为97％以上；再具体的为98％以上；再具体的为99％以上。

上述高严谨条件可为用6×SSC，0.5％SDS的溶液，在65℃下杂交，然后用2×SSC，0.1％SDS和1×SSC，0.1％SDS各洗膜一次。

其中，序列表中的SEQ ID№：1由2518个核苷酸组成，即本发明所述的bHLH03pro启动子。

含有上述bHLH03pro启动子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌也属于本发明的保护范围。

所述重组载体可为重组表达载体，也可为重组克隆载体。

所述重组表达载体是将具有序列表中SEQ ID№：1所示核酸序列的核酸片段插入pCambia1391Z载体的PstI和BamHI酶切位点之间得到的。

扩增本发明所述bHLH03pro启动子全长或其任意片段的引物对也属于本发明保护的范围。

本发明的另一个目的是提供本发明所述bHLH03pro启动子和含有所述bHLH03pro启动子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌在在驱动基因在植物中的表达中的应用。

所述应用中，所述驱动基因在植物中的表达具体为在植物根、叶片和/或花中的表达。

所述应用中，所述植物为十字花科植物；所述十字花科植物具体为拟南芥。

本发明的还一个目的是提供所述的启动子和含有所述bHLH03pro启动子的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌在培育转基因植物中的应用。

所述应用中，所述植物为十字花科植物；所述十字花科植物具体为拟南芥。

本发明又一个目的是提供一种在植物表达外源基因的方法，是将DNA片段甲导入植物中，从而在植物中表达所述外源基因；所述DNA片段甲自上游至下游依次含有所述启动子和所述外源基因。

所述方法中，所述在植物表达外源基因具体为在植物的根、叶片和/或花组织中表达所述外源基因。

所述方法中，所述DNA片段甲通过重组表达载体导入所述植物；所述重组表达载体为将权利要求1所述的启动子和所述外源基因插入pCambia1391Z载体的多克隆位点得到的重组质粒；所述启动子位于所述外源基因的上游。

所述方法中，所述植物为十字花科植物；所述十字花科植物具体为拟南芥。

本发明提供了一个启动子，该启动子可以驱动基因在植物的根、叶和/或花组织中表达。本发明有助于促进人们对拟南芥发育生长的研究，且为植物特别是十字花科的蔬菜花卉的遗传改造提供了一条经济、快速、有效的途径。本发明在农业领域具有广阔的应用空间和市场前景。

附图说明

图1为重组质粒pCambia1391Z-bHLH03pro-GUS的结构示意图。

图2为转基因拟南芥和野生型拟南芥Col-0的根、叶和花器官GUS染色情况。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。