[发明专利]一种检测锂离子的方法及试剂盒有效
申请号: | 201310229489.5 | 申请日: | 2013-06-08 |
公开(公告)号: | CN103290098A | 公开(公告)日: | 2013-09-11 |
发明(设计)人: | 李子樵;张祥洪;徐晓炎 | 申请(专利权)人: | 上海蓝怡科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/48 | 分类号: | C12Q1/48;C12Q1/44;C12Q1/34;C12Q1/28;C12Q1/26 |
代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 祝莲君;雷芳 |
地址: | 201100*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 锂离子 方法 试剂盒 | ||
1.一种测定样本中锂离子的方法,其特征在于,包括步骤:
(1)提供一液态混合体系,所述体系含有待测样本、3,5-二磷酸腺苷和3,5-二磷酸核苷酸酶;
(2)在3,5-二磷酸核苷酸酶的催化下,在所述混合体系中进行如下反应:
3,5-二磷酸腺苷→单磷酸腺苷
(3)测量所述体系中单磷酸腺苷存在与否和/或数量和/或生成率,并换算得出样本中锂离子的测量结果。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,在步骤(3)中,测定单磷酸腺苷存在与否和/或数量和/或生成率的方法,包括步骤:
(3-1)在5-核苷酸酶、腺苷脱氨酶、多核苷酸磷酸化酶、黄嘌呤氧化酶存在下,将步骤(2)的反应体系或将体系中的单磷酸腺苷进行如下反应:
单磷酸腺苷→次黄嘌呤→过氧化氢
(3-2)测量步骤(3-1)的反应体系中过氧化氢的生成率和/或数量,并得出单磷酸腺苷的测量结果。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,在步骤(3-2)中,测定过氧化氢数量的方法包括步骤:
在过氧化物酶、4-氨基安替比林、4-氯酚的存在下,将步骤(3-2)的反应体系中的过氧化氢进行显色反应,测定反应体系的吸光度或吸光度变化率,从而得出过氧化氢的生成率和/或数量。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,
步骤(1)中,所述混合体系中还含有5-核苷酸酶、腺苷脱氨酶、多核苷酸磷酸化酶、黄嘌呤氧化酶、过氧化物酶、4-氨基安替比林、4-氯酚;且
步骤(2)和步骤(3)由如下步骤(ii)和步骤(iii)代替:
(ii)在3,5-二磷酸核苷酸酶、5-核苷酸酶、腺苷脱氨酶、多核苷酸磷酸化酶、黄嘌呤氧化酶的催化下,在所述混合体系中进行如下反应:
3,5-二磷酸腺苷→单磷酸腺苷→次黄嘌呤→过氧化氢;和
在过氧化物酶、4-氨基安替比林、4-氯酚的存在下,过氧化氢进行显色反应;和
(iii)测量所述体系的吸光度或吸光度变化速率,并得出样本中锂离子的测量结果。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述混合体系还含有缓冲液、表面活性剂、稳定剂、激活剂、螯合剂、保护剂。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述的缓冲液为pH为5.5~7.5的缓冲液。
7.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述的表面活性剂为非离子型表面活性剂。
8.如权利要求5所述的方法,其特征在于,
所述的稳定剂包括牛血清白蛋白、β-疏基乙醇、L-半胱氨酸、或其组合;和/或
所述的激活剂包括无水氯化钙、七水硫酸镁、亚铁氰化钾、硫酸锌、或其组合;和/或
所述的螯合剂包括EDTA及其钠盐、聚甲基丙烯酸、有机多元膦酸、羟乙基乙二胺三乙酸(HEDTA)、二羟乙基甘氨酸、或其组合;和/或
所述的保护剂包括蔗糖、葡萄糖、岩藻糖、麦芽糖、乳糖、或其组合。
9.一种试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括:3,5-二磷酸核苷酸酶、3,5二磷酸腺苷、以及描述使用方法的说明书。
10.如权利要求9所述试剂盒的用途,其特征在于,用于检测样本中锂离子。
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