[发明专利]嗜热菌蛋白酶及其变体的生产和在液体洗涤剂中的用途

权利要求书

1.分离的嗜热菌蛋白酶变体，其中所述嗜热菌蛋白酶变体是地芽胞杆菌嗜热菌蛋白酶变体，所述变体的氨基酸序列与SEQ ID NO:3相差一个氨基酸置换，其中所述置换选自置换T006G、T006H、T006I、T006K、T006M、T006N、T006P、T006Q、T006R、T006V、T006W、T006Y、V007F、V007H、V007K、V007L、V007M、V007P、V007Q、V007R、V007T、V007Y、T049G、T049H、T049I、T049K、T049L、T049N、T049P、T049Q、T049W、A058I、A058P、A058R、F063I、F063L、F063P、S065K、S065Y、Y075G、Y075M、Y075T、Q128H、Q128I、Q128L、Q128M、Q128V、Q128Y、Y151D、Y151E、Y151H、Y151K、Y151M、Y151N、Y151Q、Y151R、Y151T、Y151V、Y151W、I156M、I156R、I156T、I156W、G196R、Q273I、Q273P、Q273Y、T278K、T278M、T278P、N280K、N280R、T006A、T006C、T049M、A056C、A056R、A056Y、A058S、S065C、S065E、S065I、S065T、Y151A、Y151C、Y151S、I156H、I156K、G196D、G196H、Q273A、Q273N、Q273T、Q273W、T278C、T278H、T278N、T278S、T278Y、N280E、N280I、N280L、N280M、N280S、T049D、T049S、A056E、A058C、A058E、Q061E、Q061M、S065D、S065P、S065V、S065W、Q128C、Q128T和I156E，其中所述嗜热菌蛋白酶变体与SEQ ID NO:3的嗜热菌蛋白酶相比具有提高的稳定性和/或性能，并且其中所述提高的稳定性提供了在洗涤剂存在情况下在稳定性测定法中大于1.0的性能指数(PI)，和/或其中所述提高的性能提供了在血液/乳/墨(BMI)微型布样测定法中大于1.0的性能指数(PI)。

2.用于产生具有嗜热菌蛋白酶活性的酶的方法，其包括:

i)用包含编码根据权利要求1的嗜热菌蛋白酶变体的多核苷酸的表达载体转化细胞；和

ii)在适于产生所述嗜热菌蛋白酶的条件下培养所述转化的宿主细胞。

3.权利要求2的方法，其中所述方法还包括收获产生的嗜热菌蛋白酶的步骤。

4.权利要求2的方法，其中所述宿主细胞是芽胞杆菌属物种。

5.包含至少一种获自权利要求4的重组芽胞杆菌属物种宿主细胞的嗜热菌蛋白酶变体的组合物。

6.权利要求5的组合物，其中所述组合物还包含至少一种钙离子和/或锌离子。

7.权利要求5的组合物，其中所述组合物还包含至少一种稳定剂。

8.权利要求7的组合物，其中所述稳定剂选自硼砂、甘油、锌离子、钙离子和甲酸钙。

9.权利要求7的组合物，其中所述稳定剂是至少一种在阴离子表面活性剂存在的情况下稳定该至少一种嗜热菌蛋白酶的竞争性抑制剂。

10.权利要求5的组合物，其中所述组合物是清洁组合物。

11.权利要求10的组合物，其中所述清洁组合物是洗涤剂。

12.权利要求5的组合物，其还包含至少一种选自蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、甘露聚糖酶、果胶酶、角质酶、氧化还原酶、半纤维素酶和纤维素酶的酶。

13.权利要求5的组合物，其中所述组合物包含至少0.0001重量百分比的所述嗜热菌蛋白酶变体。