[发明专利]一种基于LSPR的无实体壁微阵列芯片及其应用有效
申请号: | 201310231620.1 | 申请日: | 2013-06-09 |
公开(公告)号: | CN103335984A | 公开(公告)日: | 2013-10-02 |
发明(设计)人: | 杜亚楠;谢丽萍;鄢晓君 | 申请(专利权)人: | 清华大学 |
主分类号: | G01N21/55 | 分类号: | G01N21/55 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100084 北京市海淀区北京*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基于 lspr 实体 阵列 芯片 及其 应用 | ||
1.一种微阵列芯片专用的亲疏水模式片基,包括基底和设于所述基底上的若干亲水区域及将所述亲水区域隔开的疏水区域,其特征在于:所述亲水区域是在所述基底上通过偶联剂连接具有局域表面等离子共振属性的金属纳米材料;所述疏水区域是在所述基底上连接疏水材料;所述亲水区域的外部区域无实体壁。
2.根据权利要求1所述的片基,其特征在于:
当所述基底为玻璃时,
所述偶联剂可为硅烷偶联剂,具体可为氨丙基三乙氧基硅烷,所述氨丙基三乙氧基硅烷通过硅氧端与所述玻璃中的硅通过共价键结合;所述金属纳米材料与所述氨丙基三乙氧基硅烷的铵根离子通过静电相结合;
所述疏水材料具体可为十八烷基三氯硅烷,所述十八烷基三氯硅烷通过硅氧端与所述玻璃中的硅通过共价键结合;
和/或,所述金属为金;
和/或,所述片基为长方形,其宽为76mm、长为26mm;每个所述亲水区域呈直径为7mm的圆形;每个所述片基上共设所述亲水区域24个,呈8×3阵列均匀分布,相邻两个所述亲水区域的圆心距为9mm。
3.权利要求1或2所述微阵列芯片专用的亲疏水模式片基的制备方法,包括如下步骤:将在所述疏水区域连接了所述疏水材料的所述基底浸泡于所述偶联剂溶液中,获得在所述亲水区域连接了所述偶联剂的、在所述疏水区域连接了所述疏水材料的基底;然后,再将该基底浸泡于含具有局域表面等离子共振属性的金属纳米颗粒的溶液中,获得所述微阵列芯片专用的亲疏水模式片基。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:
在两次所述浸泡间,还包括将所述基底用水洗后于120℃加热3小时的步骤;
当所述基底为玻璃、所述疏水材料为十八烷基三氯硅烷时,
所述疏水区域连接了所述疏水材料的所述基底是按照包括如下步骤的方法制备得到:制备设有若干通孔的聚二甲硅氧烷平板,在所述平板一侧面的通孔外区域涂体积百分含量为1%的十八烷基三氯硅烷的正己烷溶液,再将该侧面扣压于玻璃基底上,去除所述平板,将所述基底晾干;进一步地,在将所述基底晾干后,还可包括将所述基底用75%乙醇擦拭后于60℃加热30分钟的步骤;
当所述基底为玻璃、所述偶联剂为氨丙基三乙氧基硅烷时,
所述偶联剂溶液的浓度为100g/L,所述浸泡于所述偶联剂溶液中的时间为15分钟;所述浸泡于含具有局域表面等离子共振属性的金属纳米颗粒的溶液中的时间为至少18小时。
5.权利要求1或2所述片基在制备微阵列芯片中的应用。
6.一种微阵列芯片,为如下1)或2)或3)的芯片:
1)是在权利要求1或2所述片基亲水区域的所述金属纳米颗粒上连接特异检测待测物质的亲和分子,获得所述微阵列芯片;
2)是在权利要求1或2所述片基亲水区域的所述金属纳米颗粒上连接特异检测待测物质的亲和分子和抗非特异性吸附分子,获得所述微阵列芯片;
3)当所述亲和分子为单链核酸分子A时,是在1)或2)所述微阵列芯片的所述亲和分子上通过碱基互补配对的方式连接表面通过巯基修饰了单链核酸分子B的具有局域表面等离子共振属性的金属纳米颗粒;该金属纳米颗粒中的金属具体可为金。
7.根据权利要求6所述的芯片,其特征在于:
当所述待测物质为腺嘌呤核苷三磷酸时,所述单链核酸分子A的核苷酸序列为序列表序列1所示序列,所述单链核酸分子B的核苷酸序列为序列表序列2所示序列;
当所述待测物质为血管内皮生长因子时,所述单链核酸分子A的核苷酸序列为序列表序列3所示序列;
当所述待测物质为沙门氏菌时,所述单链核酸分子A的核苷酸序列为序列表序列4所示序列。
8.权利要求6或7所述微阵列芯片在检测核苷三磷酸分子、蛋白质或细菌中的应用;所述应用为非疾病治疗诊断方法。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于:所述检测包括如下步骤:将待测物质加入权利要求6或7所述微阵列芯片的所述亲水区域,检测所述加入后和所述加入前的所述亲水区域在波长为540nm光下的吸收强度的差值。
10.用于固定权利要求6或7所述微阵列芯片并与所述检测的仪器相匹配的适配器;所述适配器具体可由两块聚甲基丙烯酸甲酯平板通过紫外固化胶粘合制成;当所述仪器为微孔板检测系统SpectraMax M5/M5e时,所述适配器由如下两块聚甲基丙烯酸甲酯平板通过紫外固化胶粘合制成:
一块为宽为86mm、长为128mm的长方形,并在其内设4个间距为4mm的长为71.2mm、宽为23mm的长方形通孔;
另一块为宽为86mm、长为128mm的长方形,并在其内设4个间距为1.55mm的长为76mm、宽为26mm的长方形通孔。
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