[发明专利]桃果实中酚类化合物的高效液相测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及桃果实中酚类化合物的高效液相测定方法，属于化学工业中的化学分析及仪器分析技术领域。

背景技术

桃果实具有很好的营养价值、药用价值和保健价值，富含大量对人类健康有益的化学物质和色素，包括酚类化合物、维生素C、维他命E和类胡萝卜素等（Byrne等，2004）。研究表明桃果实的抗氧化能力与酚类化合物紧密相关，其抗氧化能力超过花色苷、类胡萝卜素和Vc（Chang 等，2000；Gil等，2002；Leontowicz等，2002；Celia等，2009；沈志军等，2012）。近年从酚类化合物视角进行以有益健康为选育目标的桃种质评价和创新研究工作已经开展，而明确酚类化合物的组分及含量是对其进行开发和利用的前提（Cevallos等，2006）。

近10年，国外对桃酚类化合物的研究报道较多，并且已启动了从酚类视角进行以有益健康为选育目标的桃种质评价和创新研究（Cevallos等，2006），包括桃品种总酚含量的测定及抗氧化能力评价（Gil等，2002、Byrne等，2004；Claudio等，2008）、酚类化合物种类及含量分析（Celia等，2009；Scordino等，2012）、不同发育时期（Andreotti1等，2008）、栽培条件（Tavarini等，2012）及贮藏温度和时间(Asami等，2003)对酚类化合物组分的影响等。但是国内的研究还处于对总酚含量的测定层面，少数研究对几个组分作了初步分析（綦菁华等，2006；戴军等，1996），对抗氧化能力的评价也仅见沈志军等（2012）的报道。国内外对桃酚类化合物的组分分析均采用HPLC法，目前HPLC检测还存在许多不足，如局限于少数酚类、各类型酚类化合物分别在不同的条件下测定、流动相组成及梯度洗脱条件复杂、检测时间长等(Claudio等，2008；Andreotti等，2008；Scordino等，2012)。

公开号为CN101126752B的中国发明专利公开了一种同时测定水果中多种酚类化合物含量的方法，它采用甲醇作为标准品及样品的溶剂，并用甲醇作为流动相中的有机相，成功分离测量了8种酚类化合物，但是酚类化合物的提取需要在酸性条件下进行，最好是在PH3-5的范围内，如果提取时PH值太高，会引起酚类化合物的氧化、聚合或者沉淀析出，导致一些成份无法检出。该方法的酚类化合物的提取液为甲醇，而甲醇的PH值为6.8--7.0，用甲醇提取会导致酚类化合物的氧化、聚合或者沉淀析出，使酚类化合物检出质量和数量受限。

发明内容

本发明的目的是提供一种能同时测定桃中多种酚类化合物的桃果实中酚类化合物的高效液相测定方法。

为达到上述目的，本发明采用的技术方案为：一种桃果实中酚类化合物的高效液相测定方法，色谱条件为：

色谱柱：C₁₈反相柱；

流动相A：甲醇（0.1% H₃PO₄）；

流动相B：水（0.1% H₃PO₄）；

流速：1.0 ml/min；

波长：280 nm；

柱温：30℃；

梯度冲洗：0~22 min，流动相B从95-29%；22~30 min，流动相B从29-95%。

甲醇（0.1% H₃PO₄）指甲醇中含0.1% H₃PO₄（体积比），以下均同。

进一步的，其步骤包括：

a 、配制6种以上酚类化合物的混合标准溶液，绘制标准溶液曲线；

b、从桃果肉中提取酚类化合物配制样品溶液；

c、在色谱条件下对样品溶液进行高效液相色谱分析；

d、将样品溶液的分析结果与标准曲线做比对，得出样品溶液中的酚类化合物含量。

进一步的，用甲醇（0.1% H₃PO₄）作为混合标准溶液和样品溶液的溶剂。

进一步的，步骤a中配制6种以上酚类化合物的混合标准溶液的步骤为：分别准确称取10 mg各酚类化合物标准品，用10 ml 甲醇（0.1% H₃PO₄）溶解定容，制得浓度为1000 mg/L的标准溶液；分别移取1.00 ml各标准溶液，混合并用甲醇（0.1% H₃PO₄）稀释，制得混合标准溶液。