[发明专利]一株用于燃料丁醇发酵的拜氏梭菌 U-57及其应用方法

权利要求书

1.一株用于燃料丁醇发酵的拜氏梭菌U-57，其特征在于，所述的拜氏梭菌Clostridium beijerinckii U-57的保藏号为CCTCC NO：M2013208。

2.权利要求1所述的拜氏梭菌Clostridium beijerinckii U-57的应用方法，其特征在于，所述的拜氏梭菌Clostridium beijerinckii U-57对葡萄糖进行发酵产丁醇；或者对蒸汽爆破材料酶解液进行发酵产丁醇。

3.根据权利要求2所述的应用方法，其特征在于，将所述的拜氏梭菌Clostridium beijerinckii U-57纯种接入活化液体培养基中37℃厌氧培养48h；然后将活化好的菌接种于种子培养基于37℃厌氧培养24h，得到的种子液用于对葡萄糖或者蒸汽爆破材料酶解液进行发酵产丁醇。

4.根据权利要求3所述的应用方法，其特征在于，所述的活化液体培养基成分为：胰蛋白胨10.0g、牛肉膏10.0、酵母浸粉3.0g、葡萄糖5.0g、氯化钠5.0g、可溶性淀粉1.0g、L-半胱氨酸盐酸盐0.5g、乙酸钠3.0g、蒸馏水定容至1.0L；调pH到6.8，灭菌；所述的种子培养基成分为：葡萄糖20g、酵母浸粉2g、醋酸铵3g、KH₂PO₄0.5g、MgSO₄0.1g、FeSO₄·7H₂O0.01g、MnSO₄0.01g、L-半胱氨酸盐酸盐0.5g，蒸馏水定容至1L，调pH到6.8，灭菌。

5.根据权利要求3或4所述的应用方法，其特征在于，对葡萄糖进行发酵时将种子液转接到葡萄糖发酵培养基，接种量为葡萄糖发酵培养基体积的6％，发酵容器装液量80%，37℃厌氧发酵72h。

6.根据权利要求5所述的应用方法，其特征在于，所述的葡萄糖发酵培养基成分：葡萄糖53.66g/L、酵母浸粉1.5g/L、醋酸铵3.82g/L、KH₂PO₄0.75g/L、MgSO₄0.2g/L、FeSO₄·7H₂O20mg/L、MnSO₄10mg/L、CaCO₃2.60g/L、L-半胱氨酸盐酸盐0.5g/L，pH为6.5，水定容至1L，灭菌，再通过无菌滤膜加入对氨基苯甲酸3mg/L、硫胺2mg/L。

7.根据权利要求3或4所述的应用方法，其特征在于，对蒸汽爆破材料酶解液进行发酵时采用以下两种方式中的任一种：

1）分步糖化发酵：取50g杨木蒸汽爆破渣，加入1L水，纤维素酶的载入量为20FPIU/g，温度为50℃，初始pH为5.5，酶解45h，过滤后以酶解液为碳源，配制发酵培养基；将种子液转接到发酵培养基，接种量为发酵培养基体积的6％，发酵容器装液量85%，37℃厌氧发酵72h；

2）同步糖化发酵：取50g杨木蒸汽爆破渣，加入1L水，配制发酵培养基，灭菌后加纤维素酶，载入量为20FPIU/g，同时将种子液转接到发酵培养基，接种量为发酵培养基体积的4％，发酵容器装液量85%，40℃厌氧发酵72h。