[发明专利]一种试剂及其在检测二价锌离子中的应用

权利要求书

1.一种试剂，特征在于它是吡哆醛荧光素酰腙,其结构式为：

2.如权利要求1所述的一种试剂的合成方法，其特征在于步骤为：将荧光素酰肼和盐酸吡哆醛按摩尔比1︰2完全溶解在乙醇溶液中，滴加1摩尔当量的无水乙酸，回流2小时，用体积比为1︰1的甲醇和石油醚重结晶得到吡哆醛荧光素酰腙。

3.一种检测二价锌离子的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）、配制pH=7.0、浓度为10mM的HEPES缓冲溶液，配制2mM的吡哆醛荧光素酰腙乙醇溶液；

（2）、按体积比250︰1将HEPES缓冲溶液和吡哆醛荧光素酰腙乙醇溶液加到干净的荧光比色皿中，在荧光分光光度仪上检测，随着待测样的加入，526nm的荧光强度逐渐增强；

（3）、把2mL的HEPES缓冲溶液、8μL的吡哆醛荧光素酰腙乙醇溶液加到另一个荧光比色皿中，分别在加入Zn²⁺溶液的体积为20、40、60、80、100、120、140、160、180、200μL时，在荧光分光光度仪上测定526nm对应的荧光强度F为134、174、224、259、309、349、389、429、489、509，以Zn²⁺浓度为横坐标，以相对荧光强度F-F₀为纵坐标绘制图，F₀﹦99，得到Zn²⁺浓度的工作曲线；线性回归方程为：F-F₀=-13.3+2.32c，c的单位为10^-6mol/L；

(4)、测定样品溶液时，将测得的荧光强度代入线性回归方程，即可求得Zn²⁺的浓度c。