[发明专利]一株红球菌以及用于制备光学纯(R)-6-羟基-8-氯辛酸酯及其它光学活性手性醇的用途有效
申请号: | 201310236252.X | 申请日: | 2013-06-14 |
公开(公告)号: | CN103451124A | 公开(公告)日: | 2013-12-18 |
发明(设计)人: | 许建和;陈睿杰;郑高伟;潘江;张玉军 | 申请(专利权)人: | 华东理工常熟研究院有限公司;华东理工大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P7/62;C12R1/01 |
代理公司: | 上海新天专利代理有限公司 31213 | 代理人: | 邬震中 |
地址: | 215500 江苏省苏州*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一株红 球菌 以及 用于 制备 光学 羟基 辛酸 其它 活性 手性 用途 | ||
1.一株产羰基还原酶的红球菌(Rhodococcus baikonurensis),保藏号为CGMCC No.7649。
2.一种如权利要求1所述的红球菌(Rhodococcus baikonurensis CGMCC No.7649)用于制备光学纯(R)-6-羟基-8-氯辛酸酯和其它光学活性手性醇的用途。
3.如权利要求2所述的用途,其特征在于:所述的用途包括下列步骤:
(a)将红球菌Rhodococcus baikonurensis CGMCC No.7649在发酵培养基中进行扩增培养,离心得到静息细胞;
(b)将(a)收获的静息细胞悬浮于缓冲水溶液中,在葡萄糖脱氢酶、葡萄糖和NAD+的存在下,对潜手性羰基化合物进行不对称还原反应,制得光学活性手性醇。
4.如权利要求2所述的用途,其特征在于:所述的步骤(a)是将权利要求1所述的红球菌Rhodococcus baikonurensis CGMCC No.7649在发酵培养基中进行扩增培养24~36h,温度20~50℃;以此培养液做为种子,基于发酵培养基体积的接种量体积比为1~10%,接种至发酵培养基中,在20~50℃下100~160rpm培养24~48h,离心得到静息细胞;
所述的发酵培养基中各组分的含量如下:葡萄糖10~50g,蛋白胨1~20g,KH2PO41~10g,K2HPO41~10g,NaCl0.1~2g,MgSO40.1~2g,水1000mL,pH3~8。
5.如权利要求2或4所述的用途,其特征在于:所述的步骤(b)是将步骤(a)获得的静息细胞,悬浮于pH为5.5~7.0的缓冲液中,静息细胞的含量为1~300g湿重/L;在葡萄糖脱氢酶、葡萄糖和NAD+的存在下,在20~35℃和振荡或搅拌下,对潜手性羰基化合物进行不对称还原反应;
所述的前手性羰基化合物在反应液中的浓度较佳的为1~300mmol/L;葡萄糖脱氢酶的用量较佳的为0.2~60kU/L;葡萄糖的用量较佳的为0.3~90g/L;NAD+的用量较佳的为0~1.0mmol/L;所述的缓冲液中共轭酸碱的总浓度为0.05~0.1mol/L;
所述的潜手性羰基化合物为ε-酮酯或α-酮酯类化合物。
6.如权利要求3所述的应用,其特征在于:所述的潜手性羰基化合物为6-羰基-8-氯辛酸乙酯或者如结构式1或2所示的潜手性羰基化合物:
或
式1 式2,
其中,R1为-CH3、-CH2CH3、-(CH2)2CH3、-CH(CH3)2、-C(CH3)3;R2为-CH3或-(CH2)2C6H5。
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