[发明专利]一种从雷公藤叶中分离雷公藤内酯二醇的方法

权利要求书

1.一种从雷公藤叶中分离雷公藤内酯二醇的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1）将雷公藤叶磨成粉末，过筛，用乙醇水溶液回流提取后，将得到的提取液蒸去乙醇得到水悬浮物；

2）在水悬浮物中加入1～3倍体积的正己烷或60～90℃石油醚或庚烷搅拌混合，过滤分层后取水相，加入1～2倍水相体积的有机混合溶剂搅拌，分层后分液，取上相蒸干得到有机相萃取物；

3）将有机相萃取物上硅胶柱层析，然后用体积比为1:2～3的正己烷和乙酸乙酯的混合物洗脱，洗脱液浓缩蒸干得到雷公藤内酯二醇粗品；

4）雷公藤内酯二醇粗品用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水所构成的四元两相体系分配，其中正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为1～2:8～10:1～2:8～10，分液，下相蒸干得到四元分配物；

5）将上述四元分配物上高速逆流色谱进行精制，所用的溶剂体系为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，其中正己烷、乙酸乙酯、甲醇和水的体积比为1～2:4～6:1～2:4～6，置于分液漏斗中，摇匀、静置分层，平衡后，将上、下相分开；用上相作固定相，下相作流动相；或者下相作为固定相，上相作为流动相，控制仪器转速为500r/min，流速为4～7mL/min，根据检测器的谱图分步收集目标物，减压浓缩得到雷公藤内酯二醇精品。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1）中的乙醇水溶液为含水体积浓度10～30%的乙醇，回流提取为2～4次，每次提取0.5～2小时，每次每克雷公藤叶粉末用含水体积浓度10～30%的乙醇6～10毫升。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述步骤2）中的过滤后滤液分层是采用静置放置1～12小时。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤2）中的有机混合溶剂为乙酸乙酯和甲醇的混合物，其体积比为20～5:1。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤3）中的正己烷和乙酸乙酯的混合物中的正己烷可采用60～90℃石油醚或庚烷进行替换。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤3）中的硅胶柱层析的具体参数为：每克有机相萃取物吸附在一克硅胶上，每克有机相萃取物需硅胶填料50～100克，需用体积比为1:2～3的正己烷和乙酸乙酯的混合物250～500毫升洗脱。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤5）中上相作固定相，下相作流动相时，用上相充满整个高速逆流色谱中色谱柱，调整高速逆流色谱主机正转，将下相从柱子的首端泵入柱内进行洗脱，待整个体系建立动态平衡后由进样阀进样。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤5）中用下相作为固定相，上相作为流动相，用下相充满整个高速逆流色谱中色谱柱，调整高速逆流色谱主机正转，将上相从柱子的尾端泵入柱内进行洗脱；待整个体系建立动态平衡后，由进样阀进样。