[发明专利]一种用于宫颈癌筛查的检测试剂盒

说明书

技术领域

    本发明具体涉及免疫试剂产品领域，具体涉及一种用于宫颈癌筛查的检测试剂盒。

背景技术

目前，P16^INK4a蛋白在宫颈癌及癌前病变中几乎100%过度表达，而在正常的宫颈上皮细胞不表达。P16^INK4a是宫颈癌相关生物标志物。近些年国内外是在病理组织切片上，采用免疫组织化学方法检测P16^INK4a，将其用于科学研究或用于辅助病理诊断。目前国内外尚未有P16^INK4a双抗体时间分辨免疫荧光检测试剂盒用于癌症筛查的报道。

发明内容

本发明的目的就是针对目前P16^INK4a蛋白在宫颈癌及癌前病变中几乎100%过度表达，而在正常的宫颈上皮细胞不表达。P16^INK4a是宫颈癌相关生物标志物。近些年国内外是在病理组织切片上，采用免疫组织化学方法检测P16^INK4a，将其用于科学研究或用于辅助病理诊断。目前国内外尚未有P16^INK4a双抗体时间分辨免疫荧光检测试剂盒用于癌症筛查的报道之不足，而提供一种P16^INK4a双抗体时间分辨免疫荧光检测试剂盒。

本发明由盒体、有P16^INK4a抗体包被的96 孔微孔板、Eu³⁺标记的P16^INK4抗体，有P16^INK4a抗体包被的96 孔微孔板和Eu³⁺标记的P16^INK4抗体分别放置在盒体内。

它还有增强液、封闭液、阳性对照品、抗体稀释液或/和浓缩洗涤液，增强液、封闭液、阳性对照品、抗体稀释液或/和浓缩洗涤液分别通过容器瓶放置在盒体内。

 

增强液、封闭液、阳性对照品、抗体稀释液和浓缩洗涤液以任意组合分别通过容器瓶放置在盒体内。

本发明优点是：P16^INK4a双抗体时间分辨免疫荧光检测试剂盒用于宫颈癌筛查，检测结果快速、准确、客观。我们在1286例宫颈标本中，采用P16^INK4a双抗体时间分辨免疫荧光检测试剂盒进行宫颈癌筛查，其敏感性为88.10％，特异性为93.22％，总体符合率为92.13％，阴性预测值为97.56％。P16^INK4a双抗体时间分辨免疫荧光检测试剂盒用于宫颈癌筛查，其敏感性和特异性均高于目前临床广泛应用的细胞学筛查结果，两者相比差异有显著性。证明P16^INK4a双抗体时间分辨免疫荧光检测试剂盒可以用于宫颈癌筛查。本发明使用简便，能同时检测大量样本，适用于大样本人群的宫颈癌筛查。

附图说明

图1是本发明结构示意图。

具体实施方式

如图1所示，本发明由由盒体1、有P16^INK4a抗体包被的96 孔微孔板2、Eu³⁺标记的P16^INK4抗体，有P16^INK4a抗体包被的96 孔微孔板2和Eu³⁺标记的P16^INK4抗体分别放置在盒体1内。

它还有增强液、封闭液、阳性对照品、抗体稀释液或/和浓缩洗涤液，增强液、封闭液、阳性对照品、抗体稀释液或/和浓缩洗涤液分别通过容器瓶3放置在盒体1内。

 

增强液、封闭液、阳性对照品、抗体稀释液和浓缩洗涤液以任意组合分别通过容器瓶3放置在盒体1内。

 

筛查方法如下：

1）、用无菌细胞刷获取宫颈脱落细胞，放入保存液固定。

2）、脱落细胞中P16^INK4a蛋白提取：汲取细胞保存液5ml，用生理盐水离心洗涤2次，加入300μl蒸馏水于-20℃充分冻融2次以裂解细胞，离心取上清-20℃保存备用。

3）、P16^INK4a双抗体时间分辨免疫荧光检测试剂盒检测p16^INK4a的表达：

固相包被抗体的制备：P16^INK4a抗体用50 mmol/LpH9.6 的碳酸盐缓冲液稀释至5μg/ml，每孔100μl加入96 孔微孔板中4℃过夜，弃包被液，加入封闭液，每孔250μl，封闭过夜，弃封闭液，洗涤后真空抽干-20℃冷冻保存。