[发明专利]一种食用菌母种的基内菌丝提纯法

说明书

技术领域

本发明内容涉及一种食用菌母种的基内菌丝提纯及提纯的方法，属于食用菌制种技术领域。

背景技术

食用菌是用菌丝体做菌种，在菌种制作过程中，经常遇到母种污染问题，污染源主要为霉菌和细菌，从而导致菌种性能衰退。

由于霉菌菌丝的颜色比较特殊，有别于食用菌菌丝的颜色--白色，所以在它污染菌种以后，很容易加以识别。而细菌污染菌种以后，如果在开始时不及时检查并对有问题的试管母种加以剔除，那么当食用菌菌丝盖过细菌菌落以后，由于在外表上已无法识别，会导致这样的试管母种逃过检查而应用于转扩繁育，这样，就会使污染范围扩大，最后造成整批菌种报废。

细菌污染往往是培养基灭菌不彻底造成的。灭菌不彻底，培养基里就有细菌芽孢留下来，一锅性后果就由此造成。但即使受到细菌污染，还有一定的挽救方法。这个方法就是利用细菌菌落与食用菌菌丝在培养基上的不同表现，对食用菌的基内菌丝进行提纯，这样可有效避免优良种源丢失。

发明内容

本发明有以下二方面内容：

1、使培养基内菌丝充分生长所需的培菌时间(注：取得食用菌的基内菌丝的前提，是基内菌丝必须充分发达，其达到发达所需的时间长于试管母种常规生长时间，那么超出的时间段到底有多长，即为本发明之内容。)

2、基内菌丝的提纯方法

本发明所采用的技术方案为：

选择只污染了细菌的食用菌母种继续培养，使培养基内菌丝充分生长到底部。一般侧耳类菌种总培菌时间为20d-22d，香菇、木耳、金针菇类菌种为25d-27d，猴头菇菌种为32d。

基内菌丝的提纯方法：

①消毒：将待接种的斜面试管、酒精灯、火柴、接种铲、大号的镊子、酒精棉球、盛废物的盘子等放在超净工作台上，打开紫外灯，消毒15min～20min；

②将污染细菌的母种试管用酒精棉球反复擦拭消毒，放入超净工作台内，再将接种铲、镊子(尤其是把端)在酒精灯火焰上灭菌；

③待镊子冷却后，用镊子的把端将菌种管底部(接触培养基一侧)击碎，使培养基背面露出来；

④用接种铲从背面小心铲取黄豆大小的培养基(最好是取中间部分的培养基，这部分培养基基内菌丝较发达)接种在斜面试管上；

⑤将接种好的菌种放入培养室内进行培养，温度控制在20℃～22℃，湿度控制在60％～75％，培养1d～2d后进行检查，发现未生长的、或是有污染的及时剔除，留下纯度高、色泽正、生长健壮、并保持品种原有性状的菌种。

本发明的内容是：在全面发生细菌污染的食用菌母种中，通过一种基内菌丝提纯方法，再次获得纯度高、色泽正、生长健壮、并保持品种原有性状的菌种。此法为一防止珍贵种原丢失的有效挽救措施。

具体实施方式

方式1：本实施例中平菇菌种的基内菌丝提纯，对于只污染了细菌的平菇试管菌种继续培养，总培菌时间为20d，使平菇培养基内菌丝充分生长到底部。

提纯方法：

①消毒：将待接种的斜面试管、酒精灯、火柴、接种铲、大号的镊子、酒精棉球、盛废物的盘子等放在超净工作台上，打开紫外灯，消毒15min～20min；

②将污染细菌的母种试管用酒精棉球反复擦拭消毒，放入超净工作台内，再将接种铲、镊子(尤其是把端)在酒精灯火焰上灭菌；

③待镊子冷却后，用镊子的把端将菌种管底部(接触培养基一侧)击碎，使培养基背面露出来；

④用接种铲从背面小心铲取黄豆大小的培养基(最好是取中间部分的培养基，这部分培养基基内菌丝较发达)接种在斜面试管上；

⑤将接种好的菌种放入培养室内进行培养，温度控制在22℃，湿度控制在65％，培养1d后进行检查，发现未生长的、或是有污染的及时剔除。

提纯后的平菇试管母种经过8d的培养，平菇菌丝浓白、密、气生菌丝较多、菌落边缘齐、菌丝长势旺、生长速度快，具有原品种特有的性状。

方式2：本实施例中黑木耳菌种的基内菌丝提纯，对于只污染了细菌的黑木耳试管菌种继续培养，总培菌时间为27d，使黑木耳培养基内菌丝充分生长到底部。提纯方法参考实施例1。

提纯后的黑木耳试管母种经过10d的培养，黑木耳菌丝长势旺、密度大，菌丝洁白、菌落边缘整齐且表现出较强的生命力，具有原品种特有的性状。

方式3：本实施例中猴头菇菌种的基内菌丝提纯，对于只污染了细菌的猴头菇试管菌种继续培养，总培菌时间为32d，使猴头菇培养基内菌丝充分生长到底部。提纯方法参考实施例1。

提纯后的猴头菇试管母种经过15d的培养，猴头菌丝灰白色、浓密、紧贴斜面培养基、短而稀疏、基内菌丝多，具有原品种特有的性状。