[发明专利]一种阻断亚硝胺合成的藠头皂苷提取物制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种亚硝胺合成阻断制剂的制备方法，尤其涉及一种阻断亚硝胺合成的藠头皂苷提取物制备方法。 

背景技术

N-亚硝基化合物是一种对动物有强致癌性的化合物，目前研究的300多种亚硝基化合物中，90%以上都具有不同程度的致癌作用。亚硝胺是目前所知的最强的化学致癌物质之一。它能诱发包括人在内的各种实验动物多种组织器官包括胃、肝脏等的恶性肿瘤。因此，阻断亚硝胺的合成是防止癌症的有效途径之一。

藠头作为一种具有悠久历史的药食两用资源，具有多种生物学功能，是一种优良的具有亚硝胺合成阻断性能的天然产物。因此具有巨大的开发潜力和应用价值。

发明内容

本发明的目的在于以药食两用资源藠头为原料，通过工艺处理，得到阻断亚硝胺合成作用的皂苷提取物，利用该提取物再加入药物或食品载体可以制备亚硝胺合成阻断制剂。

本发明的技术方案是：

采用乙醇浸提法从藠头中提取得到粗提取物，再将藠头粗提取物过D101大孔树脂，收集乙醇洗脱部分，浓缩后真空干燥即得到藠头皂苷提取物。

本发明技术方案是通过以下工艺步骤实现的：

（1）   粉碎：将干燥藠头粉碎至20~50目；

（2）   粗提取：用浓度为50%~100% 的乙醇浸提藠头，乙醇加入量为藠头物料的5~30倍，浸提0.5~3小时，提取1~5次；浸提可采用超声辅助提取或水浴回流法浸提，得到提取液，过滤，滤液减压浓缩至浸膏；

（3）   萃取精提：将藠头浸膏加水溶解，过滤，取滤液，上D101大孔树脂，先用蒸馏水和5%浓度的乙醇冲洗，再用高浓度乙醇液洗脱，洗脱液中高浓度乙醇终浓度为30%~90%，洗脱液的量为柱体积的3~8倍；收集洗脱液，浓缩，真空干燥，即得藠头皂苷提取物。

提取物亚硝胺合成阻断率测定

亚硝胺合成阻断率：取10mL比色管中加入模拟胃液4mL，在37℃水浴10min取出，分别加入不同浓度的藠头皂苷溶液0.8mL，再加入1mmol/L的二甲胺溶液0.4mL，1mmol/L的NaNO₂溶液0.4 mL，用蒸馏水稀释至刻度，在37℃下恒温反应60min。用移液管吸取1mL上述溶液加到小烧杯中，加入质量分数0.5%Na₂CO₃溶液0.5 mL，于紫外分析仪上(365nm)照射15min。取出后加入质量分数1%对氨基苯磺酸1.5mL，再加入质量分数0.1%α-萘胺1.5mL，蒸馏水0.5 mL，摇匀静置15 min在525 nm下测定吸光度A₁，以去离子水代替亚硝酸钠标液的背景对照实验测定吸光度A₀₁，以蒸馏水代替藠头皂苷溶液的空白对照试验测定吸光度A₀₂。

阻断率（%）=[ (A₀₂+A₀₁- A₁) / A₀₂]×100%

本发明的有益效果是：藠头皂苷提取物的制备工艺简单易行，非常适合推广应用。该提取物阻断亚硝胺合成作用明显。藠头皂苷提取物可加入到药物载体，混合，制粒，干燥，然后按照常规的药剂制备方法制成颗粒剂、或胶囊剂、或片剂、或口服液、或注射剂；或者加入载体，按照常规方法制成保健饮料或保健食品。

具体实施方式

实施例1：将藠头粉碎，过20目筛，称取100g，加入800mL 70%的乙醇水浴回流提取2h。第二次加入600mL 70%乙醇水浴回流提取1.5h。第三次加入400mL 70%乙醇水浴回流提取1.0h。合并三次提取液，回收乙醇，再浓缩成浸膏。浸膏加入200mL蒸馏水溶解，过滤取滤液，滤液上D101大孔树脂，吸附2小时，用蒸馏水和5%乙醇洗脱，至洗脱液无颜色和蒽酮-硫酸显示无色，改用5倍柱体积的70%的乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩后真空干燥，即得阻断亚硝胺合成作用藠头皂苷提取物。

实施例2：将藠头粉碎，过50目筛，称取100g，加入800mL 90%的乙醇水浴回流提取3.0h。第二次加入600mL 90%乙醇水浴回流提取2.0h。第三次加入400mL 90%乙醇水浴回流提取1.0h。合并三次提取液，回收乙醇，再浓缩成浸膏。浸膏加入200mL蒸馏水溶解，过滤取滤液，滤液上D101大孔树脂，吸附2小时，用蒸馏水和5%乙醇洗脱，至洗脱液无颜色和蒽酮-硫酸显示无色，改用6倍柱体积的90%的乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩后真空干燥，即得阻断亚硝胺合成作用藠头皂苷提取物。