[发明专利]一种具有溶栓活性的全蝎提取物有效
| 申请号： | 201310252368.2 | 申请日： | 2013-06-24 |
| 公开（公告）号： | CN103396472A | 公开（公告）日： | 2013-11-20 |
| 发明（设计）人： | 郭立玮;付廷明;田晓然;刘峰;张伟 | 申请（专利权）人： | 陕西步长制药有限公司;南京中医药大学 |
| 主分类号： | C07K7/06 | 分类号： | C07K7/06;C12P21/06;C07K1/36;C07K1/30;C07K1/18;C07K1/20;A61K35/64;A61K38/08;A61P7/02 |
| 代理公司： | 南京汇盛专利商标事务所(普通合伙) 32238 | 代理人： | 张立荣 |
| 地址： | 710075 陕西省*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 具有 活性 全蝎 提取物 | ||
1.具有溶栓活性的全蝎提取物，其特征在于：为分子量在1000-1500Da的小分子肽的混合物，采用如下方法制备
（1）将全蝎用溶剂浸泡，粉碎，离心取上清液；将所述上清液超滤，取截留液采用硫酸铵沉淀法得到全蝎粗蛋白；
（2）将步骤（1）得到的全蝎粗蛋白采用酶水解得到酶解液；
（3）将步骤（2）所述酶解液依次经过阴离子交换层析、凝胶过滤层析和反相高效液相层析，取具有酰胺水解活性的洗脱液即得具有溶栓活性的全蝎提取物。
2.根据权利要求1所述具有溶栓活性的全蝎提取物，其特征在于：步骤（1）中所述超滤得到的截留液去除核酸后才用硫酸铵沉淀法得到全蝎粗蛋白。
3.根据权利要求2所述具有溶栓活性的全蝎提取物，其特征在于：所述截留液去除核酸的方法为：在截留液中加入聚乙烯亚胺，静置，离心取上清。
4.根据权利要求3所述具有溶栓活性的全蝎提取物，其特征在于：硫酸铵沉淀法具体为：在所述去除核酸的截留液中加入硫酸铵至饱和度为65%-75%，在0-4℃放置8-16h后，离心，取沉淀即得所述全蝎粗蛋白。
5.根据权利要求4所述具有溶栓活性的全蝎提取物，其特征在于：步骤（1）中所述超滤过程中超滤膜的截留分子量为5000-6000Da。
6.根据权利要求5所述具有溶栓活性的全蝎提取物，其特征在于：步骤（2）的具体方法为：将所述全蝎粗蛋白悬于人工胃液中，在36.5-37.5℃条件下水解4-6h后，离心取上清即得酶解液；所述人工胃液为：含有浓度为4000-8000U/ml的胃蛋白酶水溶液，pH为1.5-2.5。
7.根据权利要求6所述具有溶栓活性的全蝎提取物，其特征在于：所述阴离子交换层析中的介质DEAE-Sepharose FF。
8.根据权利要求7所述具有溶栓活性的全蝎提取物，其特征在于：所述凝胶过滤层析过程为：先采用Sephadex G-75凝胶过滤层析，然后采用Sephadex G-25凝胶过滤层析。
9.根据权利要求8所述具有溶栓活性的全蝎提取物，其特征在于：所述反相高效液相层析中使用的色谱柱为C18柱。
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