[发明专利]二氧化锆四氧化三铁纳米颗粒的制备及其富集磷酸肽的方法

权利要求书

1.二氧化锆四氧化三铁磁性纳米颗粒的制备及其富集磷酸肽的方法，包括以下几个步骤： 

二氧化锆(ZrO₂)四氧化三铁磁性纳米颗粒的制备(简写为Fe₃O₄@ZrO₂)采用化学共沉淀法合成，其化学反应式为： 

Fe²⁺+2Fe³⁺+8NH₃·H₂O＝Fe₃O₄↓+8NH⁴⁺+4H₂O 

步骤如下： 

(1)将可溶性的Fe²⁺和Fe³⁺溶解在不同体积比的水-无水乙醇混合溶液中，在机械搅拌下通氮气10～50min。 

(2)将温度升高到40～70℃，在搅拌状态下缓慢滴加氨水溶液到体系中，调节体系的pH值到10～11左右，得到黑色的含磁性颗粒溶液。 

(3)在搅拌状态下迅速加入一定量的氧氯化锆溶液，升温到70～90℃反应1～2h，终止反应，静置冷却，得反应液。 

(4)在外加磁场的作用下分离磁性颗粒，并且用去离子水清洗数次至中性，去除未反应完全的化学组分。 

(5)对收集到的磁性颗粒进行冷冻干燥处理，即可得Fe₃O₄@ZrO₂磁性纳米颗粒粉末。 

2.权利要求1方法制备得到的Fe₃O₄@ZrO₂磁性纳米颗粒的应用，其特征在于用于富集CPP，步骤如下： 

(1)制备酪蛋白磷酸肽的吸附原液： 

取新鲜牛奶，调pH至4.6以便沉降酪蛋白，过滤得到酪蛋白粗品。将酪蛋白粗品水解得到CPP的吸附原液。 

(2)富集磷酸肽： 

将Fe₃O₄@ZrO₂磁性纳米颗粒加入到含有CPP的吸附原液中，在一定温度下搅拌反应一定时间，使溶液中的CPP特定地吸附在Fe₃O₄@ZrO₂磁性纳米颗粒表面，在外加磁场的作用下将吸附有CPP的磁性纳米颗粒从反应溶液中分离出来，用去离子水清洗三次去除杂质，再用洗脱液进行洗脱，收集磷酸肽的洗脱液，测定N/P。 

3.权利要求1方法制备得到的Fe₃O₄@ZrO₂磁性纳米颗粒的应用，其特征在于用于富集PPP，步骤如下： 

(1)制备卵黄高磷蛋白磷酸肽的吸附原液： 

取新鲜鸡蛋进行蛋清和蛋黄的分离，将蛋黄置于滤纸上除去附着的蛋清，用针挑破膜，收集蛋黄内容物，之后进行喷雾干燥，得蛋黄粉。将蛋黄粉经一系列的脱脂、脱磷、酶解处理得到PPP的吸附原液。 

(2)富集磷酸肽：将Fe₃O₄@ZrO₂磁性纳米颗粒加入到含有PPP的吸附原液中，在一定温度下搅拌反应一定时间，使溶液中的CPP特定地吸附在Fe₃O₄@ZrO₂磁性纳米颗粒表面，在外加磁场的作用下将吸附有PPP的磁性纳米颗粒从反应溶液中分离出来，用去离子水清洗三次去除杂质，再用洗脱液进行洗脱，收集磷酸肽的洗脱液，测定N/P。 

4.根据权利要求1所述金属氧化物磁性纳米颗粒的制备工艺中，其特征在于可溶性的Fe2⁺化合物是四水氯化亚铁或七水硫酸亚铁；可溶性的Fe³⁺化合物是六水氯化铁；其中Fe2⁺与Fe³⁺的摩尔比为1∶2～2∶1，总铁离子浓度为0.01～0.5M。 

5.根据权利要求1所述金属氧化物磁性纳米颗粒的制备工艺中，其特征在于所选用的水和无水乙醇的体积比为1∶1～10∶1。 

6.根据权利要求1所述金属氧化物磁性纳米颗粒的制备工艺中，其特征在于所述的机械搅拌的转速为600～800rpm范围内。