[发明专利]一种从座壳孢菌中提取17(21)-藿烯-12β-醇的方法

权利要求书

1.本发明公开一种从座壳孢菌中提取17(21)-藿烯-12β-醇的方法，其特征包括以下步骤：

1）初级、次级培养：座壳孢菌活化后，取菌块接种到摇瓶培养基中，在120~200 r/min、20~28℃条件下连续培养5~10天即初级培养，按8％~10％接种量再次转接到摇瓶培养基中，在20~28℃条件下静止培养35~40天即次级代谢产物。

2）冷浸提取：菌液和菌丝体过滤分离，菌丝体在3℃～10℃的有机溶剂中浸泡48～72小时，过滤得浸泡液，旋蒸温度控制在35℃～40℃得浸膏，回收有机溶剂。

3）摇瓶萃取：加水溶解浸膏，水与浸膏重量比为50:1～100:1，将水溶物倒入分液漏斗中，加入1～2倍的乙酸乙酯摇瓶萃取，摇30分钟，静止30分钟，再摇30分钟，静止30分钟，待分成后取乙酸乙酯部分，旋转浓缩得粗提物。

4）分离纯化：粗提物上160～200目硅胶柱，以正己烷：乙酸乙酯梯度洗脱，收集正己烷：乙酸乙酯体积比=10:1部分洗脱液，旋蒸浓缩得粗提物A，将粗提物A上200～300目硅胶柱，以石油醚：丙酮梯度洗脱，收集石油醚：丙酮体积比=15：1部分洗脱液，得白色含晶体的物质，再将白色含晶体的物质用氯仿溶解，放在4℃冰箱里自然挥干，最后经甲醇重结晶得17(21)-藿烯-12β-醇。

2.根据权利要求1所述的一种从座壳孢菌中提取17(21)-藿烯-12β-醇的方法，其特征在于：所述步骤1）中的摇瓶培养基为沙氏培养基。

3.根据权利要求1所述的一种从座壳孢菌中提取17(21)-藿烯-12β-醇的方法，其特征在于：所述步骤2）中的有机溶剂为丙酮、乙醇、甲醇中的任一种。