[发明专利]复方龙眼多糖免疫固本方剂及其制备方法

权利要求书

1.一种复方龙眼多糖免疫固本方剂，其特征在于，由36g/kg桂圆益气补血汤中加入龙眼多糖并使龙眼多糖的浓度为80mg/kg而得；所述的桂圆益气补血汤由以下原料制备而成：龙眼肉20g、黄芪20g、当归10g、山药15g和甘草6g。

2.一种适用于权利要求1所述的复方龙眼多糖免疫固本方剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）龙眼粗多糖的分离提取：市购龙眼干果剥壳去核后，取出果肉阴干，称重，按质量体积比为龙眼肉:蒸馏水=1:4，采用热水提取，控制温度在90℃下提取4小时，过滤，滤渣重复提取3次，合并滤液，68℃下旋转蒸发仪浓缩，待提取液浓缩至粘稠状，趁热缓慢倒入4倍体积的95%乙醇中，密封静置，醇沉物为龙眼粗多糖；

（2）将龙眼粗多糖除蛋白和色素：称取龙眼粗多糖用蒸馏水配制成5.00g/ml溶液，往溶液中加入木瓜蛋白酶，使其终浓度为1g/ml，然后置于50℃恒温水浴锅中保温3h，最后于100℃灭活5min，4000r/min离心15min，去掉沉淀物，合并上清液，即得去除蛋白多糖溶液；将已去除蛋白的龙眼粗多糖配成5.00g/ml的水溶液，滴加30%H₂O₂去除色素，用量为多糖溶液体积的15.00%，用0.10mol/L的NaOH溶液调节多糖液的pH值为8.0，于45℃水浴中反应，每隔30min检测一次pH值，确保反应过程中反应液的pH值维持在8.0，4h后终止反应，冷至室温，用0.10mol/L盐酸调回中性，加入氯化钠，使其浓度为5.00g/ml，然后缓慢加入无水乙醇，使其含量达35～40%，在冰箱中4℃放置过夜，次日离心收集沉淀，经无水乙醇、丙酮反复洗涤后，45℃减压干燥，得到去除蛋白及色素后的龙眼粗多糖；

（3）除小分子：将已去除蛋白和色素的龙眼粗多糖进行溶解后装入已用蒸馏水浸泡30min除去杂质的透析玻璃纸中，夹于烧杯边缘，加入蒸馏水至完全没过玻璃纸；将蒸馏水置于5000ml广口瓶中，以1滴/s的速度通过玻璃管滴入装有透析玻璃纸的烧杯中，透析48h除去小分子杂质，然后减压浓缩，95%乙醇醇沉，即得纯化的龙眼多糖；

（4）桂圆益气补血汤的制备：称取龙眼肉20g、黄芪20g、当归10g、山药15g和甘草6g，加水浸泡30min，加入12倍量水，武火煮沸改用文火继续煎煮36min，煎煮2次，合并水煎液，3000rpm/min离心10min除杂，将水煎液浓缩至生药浓度为36g/kg；

（5）在生药浓度为36g/kg的桂圆益气补血汤中加入纯化的龙眼多糖并使龙眼多糖的浓度为80mg/kg，即得所述的复方龙眼多糖免疫固本方剂。