[发明专利]一种烟草及烟草制品中尼古丁生物碱的检测方法

权利要求书

1.一种烟草及烟草制品中尼古丁生物碱的高效液相色谱检测方法，其特征在于：以水为溶剂将烟草和烟草制品中尼古丁生物碱游离出来，并通过高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)方法检测其中的尼古丁，以尼古丁标准品的保留时间对烟草和烟草制品中的尼古丁生物碱定性，以外标法对其定量。

2.根据权利要求1所述的烟草及烟草制品中尼古丁生物碱的测定方法，其特征在于：

(1)烟草及烟草制品中尼古丁生物碱的萃取：称取200mg烟草或烟草制品中的烟丝粉末于50mL小烧杯内，加入20mL水为萃取剂，静置浸润试样，超声萃取；

(2)烟草及烟草制品中尼古丁生物碱的分析：萃取后静置，使得烟丝与萃取剂较好的分离，取萃取液经微孔滤膜过滤，收集过滤液，经流动相稀释后作为待分析样品进样分析；

色谱分析条件：

色谱柱：ZORBAX Eclipse Plus C18反相色谱柱，长度25cm，内径4.6mm，填料粒径5μm；进样量：10μL；流速：1.0mL/min；流动相：甲醇∶20mmol/LKH₂P0₄∶三乙胺＝10∶90∶0.05％(v：v，以H₃P0₄调节pH至3.2)，等度洗脱；检测波长：260nm。

3.如权利要求1和2所述烟草及烟草制品中尼古丁生物碱的萃取方法，其特征在于：超声时间20～60min，超声功率为100Hz。

4.如权利要求1和2所述烟草及烟草制品中尼古丁生物碱的萃取方法，其特征在于：以超纯水为萃取剂，萃取之前静置10～30min，使得烟丝被萃取剂充分浸润；萃取后静置10～30min，使得烟丝与萃取液充分分离。

5.如权利要求1和2所述烟草及烟草制品中尼古丁生物碱的分析方法，其特征在于：尼古丁标准品储备液配制于甲醇溶剂中，低浓度系列由储备液经流动相稀释而得，于低温暗处保存。

6.如权利要求1和2所述烟草及烟草制品中尼古丁生物碱的分析方法，其特征在于流动相中有机相与水相的配比为5∶95～30∶70，有机相也可为乙腈，水相中缓冲盐也可为其他钾盐或者钠盐。流动相pH值在2.0～5.0之间，也可以冰乙酸调节pH值。

7.如权利要求1和2所述烟草及烟草制品中尼古丁生物碱的分析方法，检测波长在250～270nm之间。