[发明专利]一种耐盐碱细菌藤黄微球菌TJTB70降解多环芳烃蒽的方法有效

专利信息
申请号: 201310264388.1 申请日: 2013-06-27
公开(公告)号: CN103275910A 公开(公告)日: 2013-09-04
发明(设计)人: 王莹莹;马克·巴特兰姆;冯伟;毛冠男 申请(专利权)人: 南开大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;B09C1/10;C12R1/265
代理公司: 天津佳盟知识产权代理有限公司 12002 代理人: 侯力
地址: 300071*** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 一种 盐碱 细菌 藤黄 球菌 tjtb70 降解 芳烃 方法
【权利要求书】:

1.一种降解蒽的耐盐碱细菌藤黄微球菌菌株(Micrococcus luteus)TJTB70(菌种保藏号:CGMCC No.7584 )降解蒽的方法,其特征在于该方法的具体步骤如下:

第1、降解蒽的藤黄微球菌菌液的培养和制备

以BH为基础培养基,添加蒽的量为25μg/L,在30℃、150rpm振荡培养5天,然后用流式细胞仪检测微生物藤黄微球菌生长状况;降解蒽的菌株最佳耐盐碱生长条件是:pH=8, NaCl的浓度为8.5%;

BH培养基组成以g/L计为:可溶性淀粉10、酵母粉5、蛋白胨5、K2HPO4 1、Mg2SO4?7H2O 0.2、Na2CO3 5、NaCl 50;

第2、接种和降解蒽

以BH为基础培养基,添加蒽的量为50μg/L,以步骤1中的箘液为菌种原液,接种浓度为104~105count/mL;放入摇床中培养降解,培养条件:温度为30℃,转速为150 r/min;

第3、降解过程中藤黄微球菌的生长情况测定

利用流式细胞仪检测细菌数量变化,仪器电压设置SSC=200,FL1=280,FL3=550,speed=3;用超纯水适当稀释样品以保证测定过程中流式细胞仪计数速度小于500 cells/s;

第4、蒽降解产物的检测

利用安捷伦Thermo DSQⅡ气相色谱-质谱联用仪对蒽讲解情况进行分析,采用DB-5石英毛细管柱;进样口温度220℃,传输线温度260℃,EI离子源260℃;气体为高纯氦气;进样量1μL,不分流进样;全扫描质量范围:50-210amu;柱温在70℃保留4 min,再以10℃?min-1的速率升到150℃,保留2 min,最后以6℃?min-1的速度升至260℃,保持15min。

2.耐盐碱细菌藤黄微球菌菌株(Micrococcus luteus)TJTB70,菌种保藏号:CGMCC No.7584 。

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