[发明专利]伯克霍尔德氏菌LH-ZY01及其在抑制立枯丝核菌中的应用

权利要求书

1.伯克霍尔德氏菌LH-ZY01（burkholderia sp.），该菌种于2012年12月18日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO： M 2012536。

2.如权利要求1所述的伯克霍尔德氏菌LH-ZY01（burkholderia sp.），该菌种的生物学特性为：革兰氏染色阴性（G^-），细胞性状为短杆状，颜色为土黄色，好氧，生理生化性状为：反硝化反应：阴性，柠檬酸盐利用；阳性，亮氨酸利用：阳性，接触酶：阳性，酒石酸盐利用：阳性。

3.采用如权利要求1所述伯克霍尔德氏菌LH-ZY01（burkholderia sp.）生产的微生物有机肥料，具体特点为：含有2×10⁸个/g以上的拮抗菌微生物、全氮含量为4.0~5.5%，所述的全氮中有90%以上是有机氮，总氮磷钾养分为7.0~12%，有机质含量为45~50%。

4.采用如权利要求1中伯克霍尔德氏菌LH-ZY01（burkholderia sp.）生产有机肥的方法，该方法包括下述的步骤：

（1）从斜面活化，经过种子扩大培养，最后进行发酵生产，其生产条件具体为：pH生长范围自然，培养温度25~38℃，溶氧：28%~100%条件下通气量范围为150~260转/分钟，液体培养基为本实验室优化，发酵周期36~48小时，发酵的拮抗菌液含菌量≥1×10¹⁰ cfu/L；

（2）将伯克霍尔德氏菌LH-ZY01制备成微胶囊，具体配方：海藻酸钠：15~30 g/L，氯化钙：30~50 g/L，脱脂奶粉：10~30g/L，菌液：1.0×10¹² cfu/L；制备微胶囊的具体的条件是：按照上述的配方及比例将菌液、海藻酸钠跟脱脂奶粉在容器罐中混合搅匀然后喷或滴加到氯化钙溶液中形成包膜胶囊，静置2~4小时后将成膜胶囊通入28-32℃的干燥空气干燥；

（3）腐熟过的固体有机物料，包括猪粪、鸡粪、羊粪和牛粪用于微生物的营养载体进行菌种二次发酵实验，在其中分别加入含有拮抗菌伯克霍尔德氏菌LH-ZY01（burkholderia sp.）菌液7~20 L的微胶囊，最终菌数10⁹个/g营养载体，添加2%的无机氮混合，堆放3~4天制成含拮抗菌数达到2~4×10⁸个/g的微生物有机肥料，中间通过翻堆控制温度在40℃以下。

5.权利要求1所述的伯克霍尔德氏菌LH-ZY01（burkholderia sp.）其16S rDNA序列如序列表1所示。

6.权利要求1所述的伯克霍尔德氏菌LH-ZY01（burkholderia sp.）在抑制立枯丝核菌中的应用。