[发明专利]一种广东虫草子实体规模化栽培方法

说明书

技术领域

本发明涉及虫草子实体栽培技术领域，具体涉及一种广东虫草子实体规模化栽培方法。

背景技术

现今世界范围内已发现的虫草属真菌有450多种，国内已报道的超过100种，广东地区则发现了30多种。有资料表明，许多虫草属真菌富含多种氨基酸、微量元素和维生素等营养成分，以及腺苷、虫草素、虫草酸等活性成分，具有抗肿瘤、抗病原、抗氧化以及增强人体免疫力等多种药理功能，随着人们生活水平的提高和对健康食品需求的增加，冬虫夏草日益受到人们的喜爱，但至今为止，冬虫夏草划还未能规模化地人工栽培，而不断增加的需求和高昂的价格导致人们对野生冬虫夏草的过度采集，使其野生资源日益稀缺。因此积极开发利用虫草属真菌资源，实现高活性虫草种类的人工生产种植具有十分重要的意义。

广东虫草（Cordyceps guangdongensis T.H.Li,Q.Y.Lin&B.Song）是目前仅发现于广东地区的一种虫草资源。经分析，这种虫草具有高活性成分，其子实体的腺苷含量达0.81mg/g，虫草酸含量达392mg/g，明显高于冬虫夏草的含量（腺苷0.27mg/g，虫草酸130mg/g），而且气味芳香，味道甘甜无毒。因此广东虫草具有一定的市场潜力，作为冬虫夏草的替代品进行产业化研究不仅是可行的，而且具有较大的经济价值和一定的科学意义。

申请号为200610035774.3的中国发明专利公开了一种高活性野生虫草菌株，其特征在于：该菌株在野外发现并采用组织分离方法获得，该菌株命名为：日本虫草广东变型（Cordyceps japonica f guangdongensis）GDIM-C050423，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC N0：M 206051，简称日木虫草广东变型GDIM-C050423 CCTCC M 206051，其菌株特性为：菌丝生长在固体培养基上，基生菌丝发达，气生菌丝甚少，光照10小时/天，3~4天后，菌丝逐渐转为黄色；子实体形态特征为：子座高5~11cm，头部稍膨大，直径3~6mm，黄褐色至黑褐色，成熟时有颗粒状小点，柄细长，直径2~4mm，褐色。

对比文件还公开了一种高活性野生虫草子实体的人工栽培方法，其特征在于：以日本虫草广东变型GDIM~050423 CCTCC M 206051为出发菌株，经以下栽培阶段：

（1）母种制作：将出发菌株接入无菌的加富PDA斜面培养基中，20~25℃下，暗培养10~15天后，光照4~6天，选取转色较快且菌丝生长整齐的菌种，作为母种；

（2）一级液体菌种制作：将经复壮挑选的母种接至无菌液体培养基中，振荡培养7~10天，选取菌丝球大小均匀一致、直径为2~3毫米的作为一级菌种；

（3）二级生产种：将一级液体菌种按V/V为3%~10%的比例接入液体培养基中，按一级液体菌种的培养方式进行培养，选取菌丝球大小均匀一致、直径为2~3毫米的作为二级生产种，用于虫草的栽培生产；

（4）接种和出草管理：在无菌室或超净工作台内，将经无菌水稀释的二级生产种接入无菌的栽培培养基中，每瓶接入17~22毫升，再进行避光培养9~14天，待菌丝长满培养基后，进行光照培养，光强400~1000Lux，空气相对湿度80~90%，18~25℃，经7~12天即可长出子实体原基，再培养40~50天；

（5）采收：待子实体顶部变成圆形，并出现颗粒状小点时，即可采收。

对比文件公开了一种日本虫草广东变型菌株，为后续日本虫草广东变型菌株的研发提供了材料，对比文件公开的栽培方法包括：母种制作→一级液体菌种制作→二级生产种制作→接种和出草管理→采收，对比文件的栽培方法存在以下不足：接种采用多级摇瓶种，多级摇瓶种的菌丝活力较弱，菌丝球大小均一度较差，很难实现大规模的自动化栽培；且菌丝萌发慢，出子实体的时间较慢，导致整个生产周期延长，浪费人力和原材料。

发明内容

为了克服现有技术中存在的缺点和不足，本发明的目的在于提供一种生产周期短、子实体产量高的广东虫草子实体规模化栽培方法。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种广东虫草子实体规模化栽培方法，包括如下步骤：

A、配料：分别配制栽培培养基、斜面培养基、液体培养基和发酵培养基，备用；

B、菌种制备：

B1、斜面菌种：将广东虫草菌种接种到所述步骤A中的斜面培养基上进行斜面培养，得到斜面菌种；

B2、摇瓶菌种：将所述斜面菌种转接到所述步骤A中的液体培养基上进行摇瓶培养，得到摇瓶菌种；