[发明专利]火焰南天竹的组培方法

权利要求书

1.火焰南天竹组培方法，其特征在于，包括以下步骤：

    (1)获取无菌材料

    于春季剪取火焰南天竹新萌发的小芽，用洗衣粉或洗衣液清洗材料后，在自来水下流动冲洗30min后于超净工作台上，用75%的乙醇浸泡20-30s，再用0.l%的升汞溶液浸泡8-15min后，用无菌水冲洗6-8次，并吸干表面水分；

    (2)火焰南天竹的初代培养

取小芽基部，切成lcm长的小段，接种于pH值为5.8-6.2的小芽诱导培养基上，所述的小芽诱导培养基的成分为MS+WPM+6-BA2.0-5.0mg/L+NAA0.2-0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L，进行芽诱导培养；小芽接种于小芽诱导培养基25d后，开始产生愈伤组织，继续培养1个月后，进行继代增殖培养；

（3）火焰南天竹的增殖培养

将带有愈伤组织的芽接种于pH值为5.8-6.2的不定芽增殖培养基上进行增殖培养，所述的增殖培养基的成分为MS+WPM+6-BA1.0-3.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L，先进行暗处理1周，再给予每日光照16h；

    (4) 生根壮苗培养

在不定芽增殖培养基中诱导出丛生芽后，将丛生芽分成小丛或单芽并接种于pH值为5.8-6.2的生根壮苗培养基中，所述的生根壮苗培养基的成分为MS+WPM+6-BA0.2-1.0mg/L+NAA

0.5-1.0 mg/L+IBA2.0-6.0 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L，进行生根和壮苗培养；

（5）驯化移栽

当根长为2-4cm时，进行驯化移栽，将培养瓶移至大棚内炼苗7-10天，洗去培养基，根部浸泡1%高锰酸钾溶液进行消毒，移栽入穴盘中，覆盖薄膜，同时遮荫75%，2周后除去薄膜，给予全光照，进行肥水管理。

2.根据权利要求1所述的火焰南天竹的组培方法，其特征在于，上述步骤（2）中，初代培养基的优选成分为MS+WPM+6-BA4.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L，pH为6.0。

3.根据权利要求1所述的火焰南天竹的组培方法，其特征在于，上述步骤（2）中，初代培养的培养温度为24-26℃，每日光照16h，光照为30-40 mo1/ms。

4.根据权利要求1所述的火焰南天竹的组培方法，其特征在于，上述步骤（3）中，增殖培养基优选配方为MS+WPM+6-BA2.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L，pH为6.0。

5.根据权利要求1所述的火焰南天竹的组培方法，其特征在于，上述步骤（3）中，增殖培养的培养温度为24-26℃，光照为30-40 mo1/ms。

6.根据权利要求1所述的火焰南天竹的组培方法，其特征在于，上述步骤（4）中，壮苗培养基的优选配方为MS+WPM+6-BA0.5mg/L+ NAA1.0mg/L+IBA4.0mg/L，pH为6.0。

7.根据权利要求1所述的火焰南天竹的组培方法，其特征在于，上述步骤（4）中，生根壮苗培养的培养温度为24-26℃，光照为40-60 mo1/ms。

8.根据权利要求1-7中任一所述的火焰南天竹的组培方法，其特征在于，所述的小芽诱导培养基、增殖培养基和生根壮苗培养基中，MS与WPM等体积混合。