[发明专利]一种油桐叶片再生植株的方法

权利要求书

1.一种油桐叶片再生植株的方法，其特征在于，包括以下步骤：

将油桐无菌苗叶片，在无菌条件下切成面积为0.5-1cm²的叶盘，接种到1/2MS+1.0-3.0mg/L6-BA+0.05-0.1mg/L IAA+0.05-0.1mg/L IBA的培养基中诱导不定芽，暗培养3-5天后，在光照条件下培养20-30天，培养温度为26士1℃，光照强度为1800-2000lx，光照时间14-16h/d；然后经过继代、增殖、壮苗和生根培养获得完整植株；最后进行炼苗、移栽。

2.根据权利要求1所述的油桐叶片再生植株的方法，其特征在于，继代培养的具体过程如下：将叶盘诱导的不定芽切下接种到1/2MS+1.0-3.0mg/L6-BA+0.05-0.1mg/L IBA的培养基中进行不定芽的继代培养，暗培养1-3天后，在光照条件下培养15-25天；培养温度为26士1℃，光照强度为1800-2000lx，光照时间14-16h/d。

3.根据权利要求1所述的油桐叶片再生植株的方法，其特征在于，增殖培养的具体过程如下：将继代培养得到的不定芽切下接种到MS+2.0-3.0mg/L6-BA+0.05-0.1mg/L IBA的培养基中进行不定芽的增殖培养，暗培养1-3天后，在光照条件下培养25-30天；培养温度为26士1℃，光照强度为1800-2000lx，光照时间14-16h/d。

4.根据权利要求1所述的油桐叶片再生植株的方法，其特征在于，壮苗培养的具体过程如下：将增殖培养得到的芽转接到MS+0.3-1.0mg/L6-BA+0.5-1.0mg/L NAA的培养基中进行壮苗培养，暗培养1-3天后，在光照条件下培养20-25天；培养温度为26士1℃，光照强度为1800-2000lx，光照时间14-16h/d。

5.根据权利要求1所述的油桐叶片再生植株的方法，其特征在于，生根培养的具体过程如下：将增殖培养获得2-4cm的苗接到1/2MS+0.05-0.3mg/LIBA的培养基中进行生根培养；培养温度为26士1℃；暗培养5-7天，再转到光照下培养5-8天生根，光照强度为1800-2000lx，光照时间14-16h/d。

6.根据权利要求1所述的油桐叶片再生植株的方法，其特征在于，炼苗、移栽的具体过程如下：

将生根后的苗先在室内进行移栽前炼苗，3-5天后从培养瓶中取出，洗净根部培养基，移栽到营养杯中，基质为泥炭土：珍珠岩：蛭石=2:1:1，组培苗移栽后保持湿度不低于80%，覆盖薄膜并每天喷水1-2次，两周后即可逐步进行正常管理。

7.根据权利要求1-6任一项所述的油桐叶片再生植株的方法，其特征在于，叶盘诱导不定芽使用的培养基为：1/2MS+2.0-3.0mg/L6-BA+0.05-0.1mg/L IAA+0.05-0.1mg/L IBA；

增殖培养使用的培养基为：MS+3.0mg/L6-BA+0.05-0.1mg/L IBA；

壮苗培养使用的培养基为：MS+0.5mg/L6-BA+0.5-1.0mg/L NAA；

生根培养使用的培养基为：1/2MS+0.05-0.1mg/L IBA。

8.根据权利要求1所述的油桐叶片再生植株的方法，其特征在于，所述的油桐无菌苗的获得过程如下：

选取成熟的油桐当年生种子，取其种皮，将种仁用自来水冲洗3-5min，然后浸泡20-30h，中间换水2-3次，然后在超净工作台中用0.1%的HgCl₂消毒3-5min，用无菌水冲洗4-6次，接种在1/2MS基本培养基中，暗培养2-3天，再转到光照条件下培养15-20天即可成苗，培养温度为26士1℃，光照强度为1800-2000lx，光照时间14-16h/d。

9.根据权利要求1所述的油桐叶片再生植株的方法，其特征在于，所述的方法中用到的培养基均附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH调至5.4-5.8。