[发明专利]一种新型绿藻多糖及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于海洋生物多糖领域，具体涉及一种新型绿藻多糖及其制备方法。

背景技术

海藻自古就在我国沿海民间直接用作药材医治各种疾病，有关海藻中有效成分的分离及其化学组成的研究，始于上世纪50年代中期。至今，从海藻中分离出的各种化合物中，多糖类化合物占有重要地位。多糖作为海藻细胞结构的主要支撑物质，大量存在于其细胞壁和细胞间质中。由于海藻多糖独特的结构和性质，引起人们的广泛关注。有关海藻多糖的化学组成、结构和生物活性已被大量研究。但是，这些研究主要集中于来自于各种褐藻和红藻的多糖，而有关绿藻中的多糖的研究极少。

目前，绿藻多糖的研究主要集中于绿藻中的石莼属、松藻属、浒苔属、礁膜属、蕨藻属和刚毛藻属中的藻类，其化学组成和结构随着绿藻种类的不同而不同，已有资料表明这些多糖主要分为两类：木糖-阿拉伯糖-半乳糖聚合物，这类多糖以阿拉伯糖和半乳糖为主要组分，并含有较高的硫酸根，其代表藻类为松藻、蕨藻和刚毛藻等；葡萄糖醛酸-木糖-鼠李糖聚合物，此类多糖以鼠李糖、木糖和葡萄糖醛酸为主要组分，代表藻属为石莼、礁膜、浒苔和顶管藻等。由于绿藻多糖结构的复杂性和不均一性，大大限制了对其深入研究。迄今尚未见有关从绿藻中提取分离到由阿拉伯糖组成的硫酸多糖的报道。

发明内容

本发明的目的是提供了一种新型绿藻多糖及其制备方法，所述绿藻多糖是一种由L-阿拉伯糖组成的硫酸多糖，L-阿拉伯糖之间以β-1,4糖苷键连接，硫酸基位于L-阿拉伯糖残基的C3位。它可用于生产研究硫酸阿拉伯聚糖的生物活性物质或中间体，具有广泛用途。

为实现上述发明目的，本发明采用下述技术方案予以实现：

一种新型绿藻多糖的制备方法，它包括以下步骤：

a、取干燥的海藻，向海藻中加入海藻重量10~80倍的水浸泡匀浆， 20~24℃下提取10~120分钟；分离出藻渣，向藻渣中加入海藻重量10~80倍的水，在60~100℃下加热提取30~480分钟，分离出清液；

b、将所得清液浓缩、脱盐得多糖溶液，将所述多糖溶液浓缩、干燥，将干燥后的多糖加水配成重量百分比浓度为0.1%~8%的水溶液；

c、然后通过离子交换色谱柱分离、凝胶色谱柱分离，将所得多糖溶液浓缩、脱盐，将脱盐后的溶液浓缩、干燥得新型绿藻多糖。

进一步的，所述海藻为条浒苔。

进一步的，所述步骤b和c中脱盐采用透析的方法。

进一步的，所述步骤b和c中浓缩为减压浓缩。

进一步的，所述步骤c中的离子交换色谱柱为色谱柱Q Sepharose FF，依次分别用蒸馏水、1.0 mol/L氯化钠水溶液和2.5 mol/L氯化钠水溶液洗脱。

进一步的，所述步骤c中的凝胶色谱柱为色谱柱Sephacryl S-400 HR，所用的洗脱液为0.2 mol/L碳酸氢铵水溶液。

进一步的，所述步骤b和c中的干燥为冷冻干燥；或用加入3~5倍体积的95%乙醇使多糖沉淀，将所得沉淀在40~80℃烘箱中干燥0.01~8 小时。

本发明还提供了根据所述的制备方法制得的新型绿藻多糖。

所述绿藻多糖为由L-阿拉伯糖组成的硫酸多糖，L-阿拉伯糖之间以β-1,4糖苷键连接，硫酸基位于L-阿拉伯糖残基的C3位，绿藻多糖的硫酸基重量百分比为30~35%，结构分子式如式Ⅰ所示：

式Ⅰ

其中n=350，R=H 或SO₃H或SO₃Na。

与现有技术相比，本发明的优点和技术效果是：本发明首次从绿藻中提取分离到硫酸阿拉伯聚糖，所述绿藻多糖是一种具有强聚阴离子性质的硫酸多糖，来源于天然海藻，结构独特，可用于生产研究硫酸阿拉伯聚糖的生物活性物质或中间体，使其能得到充分利用，其功能和活性也能得到广泛的开发。

结合附图阅读本发明的具体实施方式后，本发明的其他特点和优点将变得更加清楚。

附图说明

图1是本发明所述绿藻多糖的柱前衍生高效液相色谱。

图2A是本发明所述绿藻多糖的高效凝胶渗透色谱。

图2B 是多糖标准品的分子量对数对保留时间（高效凝胶渗透色谱法测定）绘制的标准曲线及其回归方程。

图3是本发明所述绿藻多糖的红外光谱。

图4是本发明所述绿藻多糖的¹H NMR谱。

图5是本发明所述绿藻多糖的¹³C NMR谱。