[发明专利]有毒微囊藻菌株及其毒素纯化方法无效

专利信息
申请号: 201310278386.8 申请日: 2013-07-04
公开(公告)号: CN103484394A 公开(公告)日: 2014-01-01
发明(设计)人: 李效宇;周春娥;段红英;刘洋;张榜军;马军国;方倩 申请(专利权)人: 河南师范大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12P21/04;C07K7/56;C07K1/14;C12R1/01
代理公司: 中国商标专利事务所有限公司 11234 代理人: 毋军
地址: 453000 *** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 有毒 藻菌 及其 毒素 纯化 方法
【权利要求书】:

1.一种有毒微囊藻菌株,为铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa),保藏号为CCTCC M 2013146。

2.如权利要求1所述的有毒微囊藻菌株毒素的纯化方法。

3.步骤如下:

(1) 大量培养该单种微囊藻培养物,收集培养物离心后获得藻浆;

(2) 采用煮沸法提取微囊藻细胞抽提液,即将藻浆煮沸,静置冷却后12 000 × g离心,取上清液,即获得微囊藻细胞抽提液;

(3) 用质量百分比70% 的甲醇4° C 下抽提,12 000 × g离心,取上清液;

(4) 将获得的上清液在60 °C下旋转蒸发干燥;

(5) PBS重新溶解后过C18 ODS 柱子;

(6) 质量百分比20% 甲醇洗脱后再用质量百分比100%甲醇洗脱;

(7) 将收集的洗脱液在60 ° C下旋转蒸发干燥;

(8) PBS溶解干燥的粗毒素 - 20 °C保存。

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