[发明专利]光子晶体微球液相芯片化学发光法高灵敏度多重检测真菌毒素的方法

权利要求书

1.一种用光子晶体微球液相芯片化学发光法检测真菌毒素的方法，其特征在于，利用光子晶体微球为真菌毒素探针载体，在微球表面进行竞争免疫检测多个真菌毒素，以黄曲霉毒素、伏马毒素和赭曲霉毒素为检测对象，通过真菌毒素与微球表面固定的抗原竞争结合各自毒素抗体，利用辣根过氧化物酶标记的二抗与真菌毒素抗体特异性结合，利用光纤光谱仪测量微球反射峰进行解码，利用多功能酶标仪对化学发光信号进行同时高通量检测。

2.根据权利要求1所述的方法，包括以下步骤：

（1）光子晶体微球的制备；

（2）光子晶体微球表面的修饰：通过体积比3：7的双氧水与浓硫酸对步骤（1）得到的微球表面进行羟基化修饰，再用γ-缩水甘油氧丙基三甲氧基硅烷对微球表面进行环氧基修饰；

（3）抗原的固定：通过化学键合方法分别将黄曲霉毒素、伏马毒素和赭曲霉毒素人工抗原固定于经过步骤（2）表面修饰的微球表面；

（4）用光子晶体微球流式芯片对待测样品进行竞争免疫检测；利用光纤光谱仪测量微球反射峰进行解码，利用多功能酶标仪检测化学发光信号值。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于步骤（2）中γ-缩水甘油氧丙基三甲氧基硅烷微球表面进行环氧基修饰时，120℃下烘干30-60min。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述黄曲霉毒素、伏马毒素和赭曲霉毒素人工抗原包被浓度分别为1200ng/mL，1200ng/mL，400ng/mL。抗体稀释比率为1：10000，1：10000，1：30000。二抗稀释比率为1：6000。