[发明专利]一种高消化率高粱品系的分子鉴定法有效
| 申请号： | 201310281699.9 | 申请日： | 2013-07-07 |
| 公开（公告）号： | CN103305624A | 公开（公告）日： | 2013-09-18 |
| 发明（设计）人： | 李杰勤;王丽华;詹秋文;林平;王茂辉 | 申请（专利权）人： | 安徽科技学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 233100 安徽省蚌埠*** | 国省代码： | 安徽;34 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 消化率 高粱 品系 分子 鉴定 | ||
【权利要求书】：
1.一种高消化率高粱品系的分子鉴定法，其特征在于，它包括如下步骤：
①选用引物B-1：前引物为，GACGGCCGGCACGCG；后引物为，TTCAGACTTCAGACCAAC；
②PCR扩增：扩增程序为，94℃ 预变性 5min；94℃变性 30s，58℃退火30s，68℃ 延伸30s，34个循环；最后再延伸7 min，4℃保存；
③电泳检测：取扩增好的DNA产物5μL，用2%的琼脂糖凝胶电泳检测，如有一条长度200bp左右的带则说明目标序列已扩增好；
④酶切：利用DNA回收试剂盒将扩增好的溶液回收，取20μL用Mlu I酶进行酶切；
⑤电泳检测酶切片段：用3%的琼脂糖凝胶电泳检测酶切后的DNA，电压150V，电泳30分钟，用成像仪拍照观察，如出现2条带说明该单株携带bmr-6基因，如只有1条带则不携带该基因。
2.根据权利要求1所述的高消化率高粱品系分子鉴定方法，其特征在于，步骤②中所述的PCR扩增的总体系为30μL：DNA 100ng， 2mM 引物 5μL，2 mM DNTP 6μL，KOD酶 0.5U，2倍缓冲液15μL，剩余用双蒸水补齐。
3.根据权利要求1所述的高消化率高粱品系分子鉴定方法，其特征在于，步骤④所述的酶切体系40μL：DNA 20μL，内切酶3μL，10倍酶切缓冲液4μL，双蒸水13μL。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于安徽科技学院，未经安徽科技学院许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201310281699.9/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
