[发明专利]一种基于DNA感受器的粘膜佐剂及其制备和应用

权利要求书

1.一种基于DNA感受器的粘膜佐剂，由壳寡糖与一种编码质粒共聚交联复合而成，其特征在于：所述的编码质粒由一个载体构成，在所述的载体中插入有一段基因，所述的基因序列如SEQ ID NO：1所示。

2.如权利要求1所述的一种基于DNA感受器的粘膜佐剂，其特征在于：所述的基因为来自小鼠来源的黑色素瘤缺乏因子2全长基因。

3.如权利要求1所述的一种基于DNA感受器的粘膜佐剂，其特征在于：所述的载体为真核表达质粒，所述的真核表达质粒选自pcDNA3.1质粒或pVAX1质粒中的任意一种。

4.如权利要求1所述的一种基于DNA感受器的粘膜佐剂，其特征在于：所述的基因的氨基酸序列SEQ ID NO：2所示。

5.如权利要求1所述的一种基于DNA感受器的粘膜佐剂，其特征在于：所述的壳寡糖的分子量在3000～6000之间，脱乙酰度在75%-85%之间。

6.一种制备如权利要求1所述的基于DNA感受器的粘膜佐剂的方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）构建小鼠来源的黑色素瘤缺乏因子2编码质粒；

（2）制备质量百分比浓度为0. 1~0. 4%、PH5.5-5.7的壳寡糖溶液的步骤；

（3）将上述的壳聚糖溶液与浓度为18～25mg/ml、溶解在缓冲液中的编码黑色素瘤缺乏因子2的质粒DNA溶液在50-60℃下，以15000-17000rpm速度高速混旋，通过共聚交联作用获得粘膜佐剂，所述的粘膜佐剂的形状为球形，直径在250～350nm之间。

7.如权利要求6所述的一种基于DNA感受器的粘膜佐剂的制备方法，其特征在于：在所述的构建小鼠来源的黑色素瘤缺乏因子2编码质粒的过程中，以真核表达质粒为载体，构建含有小鼠来源的黑色素瘤缺乏因子2的质粒。

8.如权利要求7所述的一种基于DNA感受器的粘膜佐剂的制备方法，其特征在于：所述的真核表达质粒选自pcDNA3.1质粒或pVAX1质粒中的任意一种。

9.如权利要求6所述的一种基于DNA感受器的粘膜佐剂的制备方法，其特征在于：所述的缓冲液为磷酸盐缓冲液。

10.如权利要求6所述的一种基于DNA感受器的粘膜佐剂的制备方法，其特征在于：所述的壳寡糖的分子量在3000～6000之间，脱乙酰度在75%-85%之间。

11.一种药物组合物，含有有效量的权利要求1所述的基于DNA感受器的粘膜佐剂以及药学上接受的载体或者赋形剂。

12.权利要求1所述的一种基于DNA感受器的粘膜佐剂在制备预防或治疗病毒性心肌炎、或者结核病的药物或疫苗中的应用。