[发明专利]一种快速检测沙眼衣原体的实时荧光定量PCR检测试剂盒及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种沙眼衣原体基因的快速检测技术，即实时荧光定量PCR(聚合酶链式反应)检测沙眼衣原体基因的试剂盒，还涉及一种沙眼衣原体基因拷贝数与传统沙眼衣原体细胞培养包涵体形成单位(IFU)计数之间的换算方法。适用于沙眼衣原体快速定量检测及其应用。

背景技术

沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis，C. trachomatis)是一种严格胞内寄生的原核细胞型微生物，具有独特的生命周期，即原体(elementary bodies，EBs)感染宿主细胞后发育为始体(reticulate bodies，RBs)，始体进一步发育分裂为原体从宿主细胞释放，重复感染过程。因此原体(EB)是感染型，与沙眼衣原体的感染能力有关(Abdelrahman YM，Belland RJ：The chlamydial developmental cycle.FEMS microbiology reviews2005，29(5)：949-959)，分布于细胞外，如生殖道的分泌物中的沙眼衣原体以EB形式存在，可通过接触传播(Choroszy-Krol，I.C.，Frej-Madrzak，M.，Jama-Kmiecik，A.，Bober，T.&Jolanta Sarowska，J.Characteristics of the Chlamydia trachomatis species-immunopathology and infections.2012，799-808)。因此，通过检测分泌物中的沙眼衣原体EB的DNA，可作为是否具有传染性的评估指标之一。沙眼衣原体可导致沙眼，是人类致盲的主要因素，也可通过性传播感染，是目前全球最常见的性传播疾病(Sexually Transmitted Diseases，STDs)病原体，尤以育龄期妇女生殖道沙眼衣原体的感染率为高(Goulet V， de Barbeyrac B，Raherison S，et al.Grp CSF：prevalence of Chlamydia trachomatis：results from the first national population-based survey in France.Sex Transm Infect 2010；86：263-27)。沙眼衣原体感染的特征为易复发和隐匿感染，若未经及时发现和有效治疗，沙眼衣原体可上行感染导致盆腔炎症疾病(pelvic inflammatory disease，PID)或输卵管性炎症等而致不孕不育(Land JA，van Bergen JE，Morre SA，Postma MJ.Epidemiology ofChlamydia trachomatis infection in women and the cost-effectiveness of screening.Hum Reprod Update2010；16：189-204.)，且可诱发因免疫病理反应而致的自身免疫性疾病(Rizzo，A.，et al.，The Role of Chlamydia and Chlamydophila Infections in Reactive Arthritis.Internal Medicine，2012.51(1)：p.113-117)。因此，沙眼衣原体己成为危及人类健康卫生的重要原因之一，迫切需要开展沙眼衣原体感染性疾病的早期诊断研究。